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浅谈镀膜技术在生物电镜中的应用

时间:2021-09-03      阅读:161

受徕卡显微系统生命科学应用部的邀请,2020年12月29日北京大学生命科学学院仪器中心电镜平台的资深技术工程师,刘轶群老师,在徕卡网络直播平台讲解了镀膜技术在生物电镜中的应用。
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刘轶群,北京大学生命科学学院仪器中心电镜平台资深工程师,主要负责透射电镜、双束扫描电镜及高压冷冻等设备,在常规透射和扫描样品制备、基于扫描电镜三维重构的样品制备、高压冷冻、金属投影以及电镜三维重构数据处理等方面均积累了一定的经验。

真空镀膜是生命科学电镜制样中不可缺的技术,比如镀膜可以增加生物样品的导电性,保证其在电镜下更好的观察;捞在载网上的超薄碳膜可以作为样品的支撑,在负染、电子断层成像和冷冻电镜领域都有着广泛的应用;定向蒸镀金属可以获得样品高分辨率的“模型”,是金属投影、电镜复型技术的关键。

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刘轶群老师在网络讲堂中按照镀膜方式的不同类别分别讲诉了对应的硬件结构特点,镀膜影响因素,以及仪器的工作流程。

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冷冻断裂复型和DNA小角度投影可视化镀膜是生物样品相对高级和复杂的实验方法,刘轶群老师结合自己的操作经验从实验原理和操作流程上做了详细的讲解。这两种实验方法都会用到高真空镀膜仪的电子束蒸发镀膜部件,徕卡ACE600和ACE900高真空镀膜仪都可以选配这种部件。

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DNA小角度投影可视化镀膜实验方法,可以在常温透射电镜下清楚的观察和区分ssDNA和dsDNA。要想成功完成这类实验,需要注意DNA取样和制备过程中的细节步骤,以及在镀膜过程中设定合适的参数流程。刘老师通过实例图片讲解相关原理和实验注意事项。

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刘轶群老师,对实验技术勤于钻研,在透射电镜、双束扫描电镜的操作应用,还有常规和冷冻电镜制样技术都有广泛涉猎,在北京大学生科院电镜中心这样的科研平台有条件做到对各种实验技术的兼收并蓄。

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