【案例研究】双视野光片显微镜，适用于类器官及胚胎
时间：2024-06-20 阅读：332
一种灵活的光片解决方案，
用于活体样本的高分辨率大体积成像
带有FUCCI指示器的肠道类器官，跟踪细胞周期动态。由Franziska Moos提供。Liberali lab. FMI Basel（瑞士）。
展示复杂多细胞系统的动态是生物学中的一个基本目标。为了应对在大型时空尺度上进行活体成像的挑战，作者在《自然·方法》杂志上发表的一篇论文中介绍了一种开放式多样本双视野光片显微镜。研究发现，Viventis LS2 Live显微镜在以单细胞分辨率成像大型样本方面取得了显著进展。
该论文重点关注了徕卡显微系统的Viventis LS2 Live显微镜，专为大型多细胞系统的高分辨率活体成像而设计。该显微镜结合了双视野和双照明配置，使得科学家能够详细观察类器官的整体动态。论文中的一个例子展示了如何通过双检测在整个样本体中展示单个细胞。通过这种方式，这款显微镜中的光片排列为领域内的研究人员提供了几个关键便利。
作者强调了成功成像各种样本，包括成熟的肠道类器官、囊胚样类器官、水螅和人类结肠癌类器官。这些大型样本的大小高达550微米，持续成像时间长达12天，为它们的动态行为提供了宝贵的见解。
由于照明和检测物镜对的dute3D排列，该系统为顶部开放式样品架提供了空间，该样品架具有最多四个样品室。它将光片显微镜的3D成像能力与多位置成像相结合。即使在存在样本间异质性的情况下，也能得出稳定可靠的结论。此外，这些样品室允许在实验过程中通过顶部进行加样。
作者展示了如何利用显微镜的dute功能。在一个实验中，他们追踪了成熟小鼠肠道类器官的发育，目的是在三天内观察隐窝和绒毛的形成。显微镜的出色分辨率和时间能力为这些大型样本中的单细胞动态提供了详细洞见。
小鼠肝脏和人类结肠癌类器官的能像能力展示了显微镜的通用性。作者使用的其他样本类型还包括小鼠腮腺唾液腺类器官和囊胚样类器官。在每种情况下，显微镜都一致地提供高质量图像，同时保持进行准确科学分析所需的自然生长和环境条件。
通过使用高阶的追踪、分割和免疫荧光技术，显微镜实现了高质量的单细胞数据采集。论文的作者提供了有关成像样本中不同细胞类型行为和成熟过程的宝贵见解的示例。在整个类器官体积内进行活体成像和免疫荧光的结合在揭示复杂的细胞动态方面发挥了重要作用。
要了解有关开放式、多样本、双视野光片显微镜的更多信息，请阅读《自然·方法》上的开放获取出版物。
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阅读全文：
开放式多样本双视野光片显微镜用于大型多细胞系统的活体成像
《自然·方法》（2024）。
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