激光共聚焦成像是一项非常成熟的技术，随着光谱式检测方法成为共聚焦成像的主流，对于多色成像/拆分也愈发成熟，利用不同荧光染料的发射光谱的不同来进行多通道拆分能够满足大多数情况下的需求，但是由于存在一些发射光谱大幅重叠的荧光标记组合和一些自发荧光信号的存在，有时候利用荧光强度还是不能够很好的拆分多荧光标记。此时除了利用智能分析软件来进行基于荧光强度拆分的方法之外，还可以利用荧光寿命来进行成像。荧光寿命是荧光物质的固有属性，与染料浓度、激发光强度等因素无关，取决于染料内在性质以及所处的微环境，因此相比于荧光强度成像，荧光寿命成像会更加稳定，并能同步获取更多维度的数据信息。

荧光强度图像（左）与荧光寿命图像（右），红色：细胞膜；青色：叶绿体；黄色：肌动蛋白。

对于长时间活细胞观察实验而言，由于荧光寿命并不会受到荧光漂白所影响，所以更适合一些定量实验。

用Oregon Green 488-BAPTA标记的钙震荡动态
荧光寿命还受到染料所处微环境的影响，所以往往被用来开发生物传感器来检测一些细胞微环境的指标，比如pH值等。利用检测pH变化来观察溶酶体成熟过程

5月24号 15:30-16:10，STELLARIS助您探索荧光成像新世界，基于荧光寿命成像的各种新应用。此次讲座，还会介绍人工智能分析软件Aivia，从图像中提取更丰富的信息，精彩知识分享，等你参加！

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讲师介绍

齐瑶

徕卡生命科学应用专员

2015年毕业于日本神户大学医学部，研究方向为分子药理学。拥有多年细胞分子生物学科研经历，在宽场显微镜成像和激光共聚焦显微镜的各类应用领域积累了丰富经验。2019年加入徕卡，主要负责光学显微镜产品的技术支持。
直播预告：显微图像的定性与定量，Aivia 人工智能分析全流程

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