高速逆流色谱仪的应用概念
时间:2024-02-22 阅读:717
高速逆流色谱仪是一种液相色谱技术,利用液液两相的逆流分配,在不需要使用固态固定相的情况下,通过离心力将固定相保留在一系列连接的腔体中,实现复杂化学物质的混合物分离。它以液体溶剂为固定相,利用离心力产生的恒定力将两相互相混合,保留其中一相,并通过恒流泵连续输入另一相,样品溶质在两相之间反复分配,按分配系数的次序逐渐洗脱出来。
高速逆流色谱法是建立在单向性流体动力平衡体系之上的一种逆流色谱分离方法,它是在研究旋转管的流体动力平衡时偶然发现的。当螺旋管在慢速转动时,螺旋管中的两相都从一端分布到另一端。用某一相作移动相从一端向另一端洗脱时,另一相在螺旋管里的保留值大约50%,但这一保留量会随着移动相流速的增大而减小,使分离效率降低。但使螺旋管的转速加快时,两相的分布发生变化。当转速达到临界范围时,两相就会沿螺旋管长度分开,其中一相全部占据首端的一段,我们称这一相为首端相,另一段全部占据尾端的一段,称为尾端相。高速逆流色谱正是利用了两相的这种单向性分布特征,在高的螺旋管转动速下,如果从尾端送入首端相,它将穿过尾端相而移向首端,同样,如果从首端相送入尾相,它将穿过首端相而移向螺旋管的尾端。分离时,在螺旋管内首先注入其中的一相(固定相),然后从合适的一端泵入移动相,让它载着样品在螺旋管中无限次的分配。仪器转速越快,固定相保留越多,分离效果越好,且大地提高了分离速度,故称高速逆流色谱。
广泛的应用范围和适应性:适用于分离各种极性范围的样品,尤其在分离天然化合物方面表现比较好。由于不需要固体载体,消除了气液色谱中的吸附现象,适用于分离极性物质和具有生物活性的物质。