让大部分ELISA实验人员头疼的问题，就是在ELISA实验后结果不理想。那碰到这种情况我们应该怎么解决呢？其实做科研实验，就是这样在不断探索中寻求真理。很难有人能*的实验成功。在做实验时那些千万不能忽视的一些小细节，还有我们在做实验过程中能够尽量避免一些误区。我们来一起简单了解下影响ELISA实验结果不理想的因素有哪些，然后尽量在实验的时候避开这些误区。  

  1. 操作前应对实验的物理参数有充分的了解，如环境温度(保持在18 c～25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等，要先查看水育箱温度，是否符合要求。

    2. 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次序要与说明书一致，否则可导致结果错误，实验重复性差。

    3. 手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数，洗液在反应孑l内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑l间窜流，造成孔问污染，导致假阴性或假阳性。

    4. 要保证加液量一致 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量不准，造成显色不统一，判断错误。

    5. 显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，以免显色过强。ELISA试剂盒的影响因素应选用有国家批准文号，质量靠得住的产品，不能图便宜，忽视质量保证。试剂应妥善保存于4℃冰箱内，在使用时先平衡至室温，不同批号的试剂组分不宜交叉使用。试剂开启后要在一周内用完，剩余的试剂下次用时应先检查是否变质，显色剂如被污染变色将造成全部显色，导致错误结果。