上海研域生物常见细胞中的三大问题是什么
时间:2024-05-15 阅读:565
五月是绿的季节。一大片一大片的绿色正肆意地生长着、壮大着。在金色的阳光下,整个五月都被这耀眼的绿覆盖了。心在不经意间畅快了起来。柳树在吐绿,树丛在发新芽,这所有的绿,是五月变得活力四射。我司都会与您相约在一起哦!
下面我公司为您详细谈谈常见细胞中常遇到的三大问题:
1、如何储存和解冻常见细胞才不会使产品质量受损?
将常见细胞从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。
我们建议细胞株应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2、常见细胞中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?
沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。
3、实验室如何选择适合的常见细胞?
国内一致认为HYCLONE的血清是比较好的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里购买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我们一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,度不高,但是其实在国外已经做得很不错了,如GIBCO等,他们在国内有办事处,我们会从那里拿,血清的品质和GIBCO不相上下,但价格相对优惠很多。
质控常见细胞的制备:
1、收集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。
2、56℃加热10小时来活。
3、离心或过滤除去沉淀。
4、用10%的小牛血清或正常人血清(PBS缓冲液)将收集的血清稀释至所需的浓度。
5、抽滤除菌,按一次使用的量分装小安瓿,封口,20℃保存备用,不可反复冻融,被检物要求检出的水平常被认为是质控血清应选择的水平。
6、标定含量,20-30次测定结果删除>±2SD数据的均值作为靶值,并与已知定值血清对比测定。
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