绝大多数ELISA试剂盒实验人员头疼的问题，莫过于试验成果不抱负。其实做科研试验，就是这样在不断探究中寻求真理。很难有人可以的试验成功。一旦出现“花板"，实验结果必须放弃，重新进行，不仅浪费物料和时间，而且还会出现样本量缺少、交叉污染、报告延迟等一系列问题。

影响因素分析如下：

一、标本因素

正确处理标本，防止大规模溶血、血浆层异物、使用一次性加样枪头，防止交叉污染。血清和血浆均可以用于检测，但血清的分离应在抽血后等血液凝固后再离心。

二、试剂因素

正确保存及使用有效试剂。使用过期试剂及底物接触金属容器、底物混合后放置时间较长均影响实验结果的准确性。选择试剂时应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好，批间差小的试剂。不同厂家的试剂不能混用，包括底物和洗涤液。检测前应将试剂放置室温平衡半小时，洗涤液应现用现配，同时观察浓缩洗涤液中有无结晶，若有结晶应放37℃水浴中融化后才可使用。

三、技术人员操作因素

严格按照相关实验SOP操作实验。加样时应尽可能的垂直加样，并加在包被孔的底部（注：勿应用力过度破坏底部包被物质），不可加在孔的上部及外部。

四、洗板机的因素

ELISA试剂盒废液瓶装满后应及时清空，以防止废液回流对管道的污染，而使洗涤不，造成“花板"。洗板结束后应用蒸馏水清洗管道，以防止废液在管道中的残留。同时应根据仪器维护保养程序，定期对洗板机进行维护保养。

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