ELISA试剂盒依据样品中检测物水平来选择科研
时间:2017-11-02 阅读:1139
ELISA试剂盒如果实验君的实验样品为人、小鼠或大鼠样品,那么要选择一个适宜的试剂盒相对简略,但如果您的实验样品来历于其他物种如鸡、牛、猴等,则市面上能供应的试剂盒种类却很少。且不可轻信能供应近万种试剂盒,覆盖多物种的供货商。但如果又非要检测这些物种的方针时,要对待检物(如有种属差异性)进行同源性剖析以及试剂盒的种属交叉反应数据。关于样品类型而言,一般的商业化试剂盒都经过血清、血浆和细胞培养上清液的验证。在选择试剂盒时,要详细阅读说明书,比如血浆样本抗凝剂的运用是否与试剂盒兼容。另外,在某些景象下样品中会存在烦扰要素比如溶血血浆、高脂肪含量的样品、人抗鼠抗体(HAMA)、细胞培养上清中含胎牛血清等。因而需根据样品来选择试剂盒,必要时还要根据样本来恰当优化。或在样品收集前,先阅读一些可靠供货商试剂盒的说明书或直接咨询。如果您的样品为组织或细胞裂解物,则需求更稳重的选择试剂盒。市面上大多数的商业化试剂盒没有经过多种来历组织样本的验证。这需求实验君能了解不是全部试剂盒所用的抗体对,都能特异的从一堆裂解物蛋白中特异检出您的目的蛋白,还要考虑组织样品的基质效应(Matrix Effect)等。但如果实验君要了解组织样品的制备问题,我们另起一文来总结。
ELISA试剂盒如果实验君关于样品中待检物的水平没有任何可参看的数据,选择宽动力学检测规划的试剂盒。如果样品中待检物的含量很低,主张选择高灵敏度的试剂盒。为了下降基质效应,有必要用稀释液至少做2倍稀释。如果样品中待检物含量远超过试剂盒的检测规划(标曲规划), 也需做恰当的倍数稀释。在zui终计算结果时,需乘以相应的稀释倍数。
一般来说,商业化试剂盒的样品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供货商的试剂盒对样品的用量要求可少至10ul。如果您的样品很名贵或较难获取,则需求细心考虑试剂盒对样品用量的要求。如果样品量少,且要做多因子检测时更需稳重。
详尽比较科研ELISA试剂盒要害性技术参数
ELISA试剂盒的要害技术参数包括板内差异性、板间差异性、批间差异性、重复性、特异性及交叉反应性、回收率等。如果实验君常常打开ELISA实验,主张运用同一厂家的试剂盒,这样可尽量确保数据的重复性(当然条件是实验条件的一致性)。关于科研用的定量ELISA试剂盒,不同的生产厂家运用的抗体对、酶以及底物、生产工艺和研发实力不尽相同,天然不同厂家试剂盒测出的数据会有差异。