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如何选择二抗之一—根据一抗种属及类型选择二抗

时间:2010-05-05      阅读:2162

检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,其中如何根据一抗的种属来源和类型选择二抗尤为重要。

一抗的种属来源

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。西美杰能为您提供zui全的抗不同种属的*二抗,包括抗小鼠二抗(anti-mouse)、抗兔二抗(anti-rabbit)、抗山羊二抗(anti-goat)、抗绵羊二抗(anti- sheep)、抗人二抗(anti-human)、抗豚鼠二抗(anti- guinea pig)、抗大鼠二抗(anti-rat)、抗猪二抗(anti-swine)、抗马二抗(anti-horse)、抗牛二抗(anti- bovine)、抗鸡二抗(anti- chicken)、抗鸭二抗(anti- duck)等。

另外,为减少二抗与样本的非特异性结合,西美杰还能为您提供不同血清吸附的*二抗。如您的检测样本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗就需要选择抗小鼠源的二抗,如果您对实验的特异性要求很高,那西美杰向您推荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗,这种二抗由于经过人血清吸附而排除了与人源组织(如Fc受体等)可能发生非特异性反应的IgG,因此将非特异性结合降低到zui低。如HRP Labled Anti-Rabbit IgG (H+L) Antibody, Human Serum Adsorbed二抗就是经过人血清吸附过的。而Anti-Mouse IgG (H+L), Extra Serum Adsorbed, Peroxidase-labele二抗则是经过多种血清吸附过的二抗。

 

一抗的类别亚型:

除了要与一抗的种属来源相一致,二抗还需与一抗的类别或亚类相匹配,这通常是针对单克隆抗体而言。一般来说多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。而单克隆抗体则相对复杂些,由于单克隆抗体有不同的类别和亚型,因此相应的二抗也需要根据这些亚型进行选择。

单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果您的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者您也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果您的一抗是小鼠IgG1,那么您可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下,可以选用抗相应物种IgG。西美杰能为您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特异性只结合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha) Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。

由于在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,因此除了需要考虑一抗的种属及类型外,还需要根据后继的检测方案选择不同标记的二抗,因此需要对二抗的标记物进行选择。

西美杰备有全面的二抗现货产品并能提供zui完整的二抗产品线。主要二抗品牌为zui大的二抗和底物生产厂商KPL以及前沿抗体生产商 ProteinTech。按照标记分,有HRP、AP、生物素等标记二抗,FITC、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等荧光二抗;按照检测物种分,有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛,以及多种细菌类二抗;另外,还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。更多产品请随时西美杰,西美杰能为您提供一站式的产品和服务支持。

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