关于透析袋的一些简单常识
时间:2013-12-23 阅读:2566
1、透析袋预处理步骤:
(1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋
(2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中将透析袋煮沸10min
(3)将透析袋用蒸馏水*漂洗
(4)将透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min
(5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作!!!
(6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
2、用过的透析袋保存前需要怎么处理?
用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置50%乙醇中保存即可;
用完以后,要*洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;
0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,我们上海佰易聚生物商城
通过老师咨询,建议前两种保存比较好!
3、透析和透析袋的处理:
透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样
品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截
留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析 袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",袋(膜)外的溶液称为"渗出
液"或"透析液"。透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析 的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,
还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
4、检查透析效果的方法是:用1% BaCl2检查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等
透析膜 (前处理方法如下):
1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中 15 min 泡软。
2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至 80℃,一边搅拌至少 30 min。
3. 换到 10 mM Na2·EDTA 中浸泡 30 min,以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。
4. 再用 80℃ 蒸馏水洗 30 min,然后换到 20% 酒精中,放在 4℃ 冰箱中保存。