人外周血淋巴细胞的产业化加速升级
时间：2016-06-15 阅读：1237
人外周血淋巴细胞适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞，主要为淋巴细胞无菌条件下所分离的细胞可用于免疫学检测。
人外周血淋巴细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞其体积、形态和密度，与其他细胞不同，红细胞和白细胞等细胞密度较大，为1.090g/ml左右，而人外周血淋巴细胞和单核细胞密度为1.090 g/ml血小板为1.035 g/ml。为此将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合调整比重、pH值和渗透压，经过澄清及除菌过滤后制成一种密度在1.077g/ml并且近于等渗的溶液，经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。
取新鲜抗凝血1ml与注射用生理盐水1:1 混匀后，小心加于2ml的细胞分离液之液面上，以400g离心(半径15cm水平转子)20分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层。*层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。收集第二层细胞放入含注射用生理盐水4-5毫升的试管分混匀后400g离心20分钟。沉淀经反复洗2次即得所需人外周血淋巴细胞。
常情况下，人外周血中是没有分裂相的，只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素（PHA）是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂，在PHA作用下，原处于Go期的淋巴细胞转化为人外周血淋巴细胞，进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性，人外周血淋巴细胞经过含有HPA培养液培养，在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体，终止分裂中期的淋巴细胞，例可得到所需的人体染色体图形。具有用血量少、操作简单等优点。