比色前将各个比色皿中装入蒸馏水。测定吸光度值时是必须用参比液的。
1、可将波长选择置实际使用的波长上，将一套比色皿都注入蒸馏水，将其中一只的透射比调至100%处，测量其他各只的透射比，凡透射比之差不大于0.5%，即可配套使用。
2、比色前将各个比色皿中装入蒸馏水，在比色波长下进行比较，误差在±0.001吸光度以内的比色皿选出4-8个进行比色测定，可避免因比色皿差异造成测量误差。
3、若各个皿差别差0.5%，通常不能配套使用。临时应急可以分别做标记，固定两只在空白和测量位置使用，千万别交叉，扣除分别的偏差值作为真正的信号值。在测量吸光度值时的时候，必须要选用参比液，这样可以减小测量的误差。选用参比液时，应尽可能地保持一致，但不包含样本。
参比液是用来调节透射比100%，即将吸光度调为0，然后再测定待测溶液的吸光度。