(1) 准备 100~1500 ug/ml 的标准品, 溶于 Bradford 法相兼容缓冲液中。对于较稀的样品，可能通过增加样品在试剂体积中的比率而扩大灵敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果样品与染料的比值太高, 可能会增加反应混合物的 PH 而导致反应背景较高。

(2) 将标准品和待测样品加人到一次性的比色皿中 (应该使用一次性的塑料比色皿或微孔板，因为染料会黏附到各种材料容器的表面上）。

(3)Bradford 试剂预热至室温。将 ImL 染料溶液加人到 25 uL 蛋白质样品中，混勻，室温孵育 10 min。

(4) 检测 450rnn 和 595nm 处的吸光度 (可以使用 570~610nm 的基于滤光器的仪器，对检测性能不会有明显的降低）。

(5) 对 595 nm 处的数据作图，或为提高在低反应值处的精度，对 595 nm/450 nm 的比率作图。标准反应曲线可以拟合为一个多项式反应，由此可以估算出待测样品的浓度值.