TEV蛋白酶是来源于烟草蚀纹病毒的nla蛋白酶中27kda的活性结构域，其氨基酸序列。tev蛋白酶具有很强的位点特异性，能够识别exxyxq(g/s)七氨基酸序列，常用序列的是glu-asn-leu-tyr-phe-gln-gly(或enlyfqg)，其切割位点在谷氨酰胺gln(p1)和甘氨酸gly(p1′)之间(即p1和p1’之间)，其序列专一性远比凝血酶、因子xa、肠激酶等蛋白酶高。
 

　　tev蛋白酶能够耐受范围广泛的ph(ph4-8.5)和温度(4-34℃)，对一些常见的增加蛋白可溶性或稳定性的添加剂(乙二醇、egta、去垢剂以及还原剂)也都有不同程度的耐受。
 

　　有研究证明，tev蛋白酶对乙二醇、egta和一些除垢剂(tritonx-100、tween-20和np-40)不敏感，当1%chaps存在时活性降低，在低浓度变性剂(2m尿素,1%sds)和还原剂(0.7mβ-巯基乙醇)中依旧可以保持大部分活性(c.sunetal.,2012)。
 

　　野生型tev酶在表达和溶解性等方面存在一定的缺陷，所以通过基因工程技术改良的突变体有大量报道。例如，天然的tev蛋白酶会发生自我切割，在表达和纯化过程中，它会不断由于其它tev蛋白酶的碰撞而发生构象变化，在特定位点发生自我切割，从而使完整的蛋白酶被截短，活性大大降低。
 

　　lucast等人找到的s219n突变体，稳定性得到很大的提高，但是可溶性并不高，有大约95%的蛋白是以包涵体的形式存在于沉淀中。kapust等人使用基因工程点突变了天然tev蛋白酶的基因序列，得到s219v这一稳定性较高并且酶活性也有稍微提高的突变体，其稳定性比s219n要高出约100倍。
 

　　其次，tev蛋白酶表达产量不高，溶解度也非常低。大约只有5%的tev蛋白酶存在于细胞破碎液的上清中，产量为12.5mg/l。
 

　　vandenberg等人通过基因改组(dnashuffling)、易错pcr(error-pronepcr)发现了一种可以将产量提高到54mg/l的突变体tevsh，其溶解度比s219n有很大提高，并且酶活性变化不大。cabrita，l.d.等人使用popmusic软件设计，对tev蛋白酶单点突变体进行稳定性分析，筛选出了五个突变体，它们的可溶性和酶活性相对于野生型tev蛋白酶都得到提升，同时还得到一个双突变体，其可溶性及酶活性相对于单突变体有显著提高。
 

　　针对tev蛋白酶本身的缺点，研究者一直在寻找改良的突变体。例如，tevser135gly突变体比wt更稳定，可以耐受对更高的温度(>40℃);还有一些突变(t17s，n68d，n177v)可以显著提高tev蛋白酶的溶解性。