细胞破碎的原理与技术
时间：2020-12-25 阅读：2677
通过均质阀后在经过高效换热器的作用下，温度在2~3秒作用会迅速下降，所以物料在温度相对较高的条件下仅仅维持多3秒钟。 渗透压冲击破碎法（osmotic shock） 渗透压冲击是较温和的一种破碎方法，将细胞放在高渗透压的溶液中（如一定浓度的甘油或蔗糖溶液），由于渗透压的作用，细胞内水分便向外渗出，细胞发生收缩，当达到平衡后，将介质快速稀释，或将细胞转入水或缓冲液中，由于渗透压的突然变化，胞外的水迅速渗入胞内，引起细胞快速膨胀而破裂。 冻融破碎法（freezing and thawing） 将细胞放在低温下冷冻（约-15℃），然后在室温中融化，反覆多次而达到破壁作用。由于冷冻，一方面能使细胞膜的疏水键结构破裂，从而增加细胞的亲水性能，另一方面胞内水结晶，形成冰晶粒，引起细胞膨胀而破裂。对于细胞壁较脆弱的菌体，可采用此法。 酶溶破碎法（enzyme lysis） 酶解是利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞，使细胞壁受到部分或*破坏后，再利用渗透压冲击等方法破坏细胞膜，进一步增大胞内产物的通透性。溶菌酶（lysozyme)适用于革兰氏阳性菌细胞的分解，应用于革兰氏阴性菌时，需辅以EDTA使之更有效地作用于细胞壁。 真核细胞的细胞壁不同于原核细胞，需采用不同的酶。 化学破碎法（chemical treatment） 采用化学法处理可以溶解细胞或抽提胞内组分。常用酸、碱、表面活性剂和有机溶剂等化学试剂 去垢剂破碎法（detergents）