MTF比色法测定slL-1的生物活性
时间：2011-12-17 阅读：1352
四甲基偶氮唑盐[3—（4.5-dimethylthiazol-2-Y1）-2，5-diphenyltetmzolimnbromide，MTF）在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用下，被还原成蓝黑色的MTr-甲脂，形成MTr-甲鐕的量与细胞增殖程度呈正相关。故通过测定细胞形成MTF-甲鐕量，可间接定量分析细胞的增殖情况，具体步骤如下：
（1）用PBS溶解MTT为5mg／mL，用0．22／zm膜滤器除菌及杂质。
（2）加MTF至培养的细胞及IL-1样品中，10uL／孔，37~C温育4ho
（3）于每孔加酸化异丙醇100t~L／孔，充分混匀以溶解底物。酸性条件使培养液中酚红指示剂变为黄色，以利于对MTr-甲脂转化物的测定。
（4）将微量测定板置室温数分钟，保证转变的底物结晶被溶解。
（5）置酶标仪，调整检测波长为570nm，参考波长为630nm。测定应在酸化异丙醇加入后1h内完成。