如何提高液相色谱柱柱效呢？
时间：2010-12-09 阅读：9670
以下介绍了几种上流行的测量和计算柱效值的方法。
1、提高液相色谱柱柱效的方法
我们知道色谱峰的扩宽与移动相在热力学的分配过程、移动相和固定相中传质阻力
所引起的不平衡有关,谱峰扩宽（非平衡）的程度是流速对传质速率的直接函数。要提
高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
（1）降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
（2）减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
（3）减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
（4）选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
（5）适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。
（6）尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相和制约的。只有通过对
柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到*的工作条件。
2、对柱效值进行跟踪测算应注意的问题
我们也应记住柱效值即塔板数只表示该色谱柱装填的好坏,只用柱效值并不足以预测
在所有条件下的柱性能,因为在这些条件下,柱性能主要表示动力学过程对色谱柱谱
带加宽的量。其他一些影响峰宽的因素,如柱外效应和热力学因素（通常表现为峰拖
尾）,在理想情况下对于确定柱效值并不起重要作用。因为任何一个柱性能的定义都
必然与用此色谱柱所做的分离相,所以依据一个单独的数字来评定柱性能是不切
实际的。对大多数色谱工作者来说,柱性能指的是色谱柱用于特定分离的能力,而仅
仅有高柱效并不能保证这种分离能力。
不管用什么特定的测试方法,都会有几个参数影响柱效的测定。这些参数包括:洗脱
液的成分和粘度及其线流速,测定塔板数所用的溶质,温度,柱长,填料装填方式,颗粒
度,还有所选用的测量和计算方法。尽管大多数柱效测算没有设法消除液相色谱仪器
系统各部件对表观峰宽的影响,但只要仪器是正常使用的,这些影响是次要的。而测
量和计算方法对柱效值的确定起着极大的作用。
3、几种测量和计算柱效值的方法
因为色谱峰是假定样品浓度在移动相和固定相中呈正态分布而得到的样品谱带分布,
故常常把色谱峰型看作正态曲线来计算理论塔板数。因此计算柱效（以理论塔板数n
为单位）的公式习惯上定义为:
式中tR为色谱峰的保留时间;σ2是以时间为单位测量色谱峰的偏差;a是和峰高（从
测峰宽的基线量起）有关的常数,ωb是峰宽,表示由色谱峰顶点与色谱峰两侧拐点处
做切线与峰底基线相交两点间的距离。
4、结论
假如一个色谱峰真是正态峰型,那么每种计算方法都会得到同样的结果。然而即使一
些比较理想的仪器和倾向于得到对称峰型的溶质,由于柱内的槽或空隙,也会出现非
正态峰型。所以不同的计算方法将会得到相差较大的n值。通常偏离正态模型的峰型
表示为“前延”或“拖尾”。对于这些峰型,越在峰的高处测量,计算的理论塔板数
值就越大（准确性越低）。在许多情况下,色谱工作者需要能反映整个峰型（包括拖尾）
的柱效值,同时为了保证定量的重复性,也需要色谱峰很好的对称性。这时对色谱峰
非对称性zui敏感的计算方法。如果目的
仅仅是要监测色谱柱从*次使用到使用寿命结束这一过程中的柱效,那么以上任何
一种方法都可以,应选择zui简便的方法。