液相色谱仪色谱柱的填充物的填充办法
时间:2019-11-24 阅读:3334
(1)柱温箱及进样阀容易出现的问题是:温控仪失灵,不能正确控制柱温箱的温度,这时只要更换一下温控仪就可以了,温控仪只在各样品系统适用性试验中有温控要求时应用,如果无要求,就不必开启;漏液,如发现对照品和样品的出峰时间都不规律,而且每次的出峰面积也差别很大,根本无法对样品进行定性和定量,这时候需要检查色谱柱和各金属细管的连接处,可能是连接处的塑料套因连接时未按要求而变形了,因其一旦变形就没法修复,所以换一个新的,按要求套上即可。
(2)高压输液泵容易出现的问题是:压力升不上去:检查一下桌面上是否有漏下的液滴,如果有拧紧漏液处即可。压力过高:看一下抽取流动相的塑料管里是否有气泡,如果有,则按一下Stop,这时候千万别抽气泡,等压力降下来,到0Psi,这时候抽出气泡。如果在过高的压力下抽气泡,后果会非常严重,流通池会被鼓破,无法分析样品,并且会给你带来很多困惑,当然如果有经验的话会及时发现,因为流通池破了后会流出蓝色的墨水样的液体。
(3)检测器容易出现的问题:流通池:以上已经提过了,如果流通池破了,则需要及时更换。氘灯:氘灯的寿命一般为2000h,如果检测器打不开了,则说明氘灯超过其使用期限,需要更换了。在日常检测中,一般在进样品之前开启检测器,样品分析完毕,及时关闭检测器,这样可以延长其使用年限,避免不必要的浪费。
(4)工作站容易出现的问题:安装工作站的电脑一般不要进行其他的工作,一旦出现问题,则需重新安装。
液相色谱仪色谱柱的填充物的填充办法:
1.所有材料均达到规定温度。
2.用所需的溶液冲洗柱底部以除去气泡,并确保柱网下没有气泡关闭色谱柱出口,并将1-2cm的缓冲液留在柱管中。
3.温和重悬填充物。
4.估计需要的悬浊液(重悬的填充物)总量。
5.向塔中加入所需体积的混合物,并用玻璃棒排干,以免产生气泡。
6.立即用该栏填充缓冲区。
7.安装立柱顶部并将立柱连接至泵。
8.打开柱口,设定泵的流量。如果混合物的体积大于柱的体积,则应连接一个额外的玻璃柱以供储存。这样使得混合物在填充时的直径维持恒定,从而减少紊流并提高柱子的填充状态。
9.在达到柱床高度后,保持填料流量至少为柱体积的3倍,并在柱上标记柱床的高度。
10.关闭泵和塔出口,取下上盖,向塔内注入缓冲液,使其向上凸起。
11.将接头以一定角度插入到柱中以确保网下无气泡。
12.沿立柱向下滑动接头(打开接头出口),直到达到标记的位置,并且接头已锁定并填满