Wondasil C18 色谱柱，也叫 ODS 柱，是分析工作中使用zui多，应用zui广的液相色谱柱，占据了液相色谱柱的半壁江山。正如世界上没有两片*相同的树叶，也没有两款一模一样的 C18 柱，如何在市场上繁杂的 C18 柱中寻找到适合自己分析的那款，是大家非常关心的话题。

　　正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为Wondasil C18 色谱柱，其它常用的反相柱还C8,C4,C2和苯基柱等。

　　Wondasil C18 色谱柱特点：

　　1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子，可以非常经济地大规模制备各种天然产物

　　2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身，分离结构非常相近的分子

　　3、载量可高达300mg样品/ml凝胶，极少需要再生，分离效果可保持十几年不变。

　　作为凝胶柱层析中的关键一环，选择合适的填料是关重要的，下面我们来了解下。

　　1.当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简易地测出PI，并选择纯化用缓冲液的佳PH。

　　2.若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解，可尝试几种不同的纯化方法：

　　(1)使用通用的凝胶过滤方法，选择分离范围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据分子量将 样品分成不同组份。

　　(2)用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质，再用以结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。

　　(3)体积大的样品，往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品，可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理，洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。