一个是激发波长，另一个是发射波长。你得到一个新的样品，你不知道它的激发波长，发射波长，那么办呢。在前辈总结下，荧光分光光度计发现样品的发射波长波动小，所以先确定发射波长。没有激发波长激发，发射波长也得不到。一般荧光样品的激发波长在300-410nm之间，你们可以查看同类物质的激发波长是多少，总结一下，在300—410nm中，先确定一个激发波长。在激发波长的激发下，出现荧光强度变化图谱，荧光强度最大的那个点所对应的发射波长，即图的横坐标上的值，为发射波长。以发射波长确定最佳激发波长原则，荧光分光光度计以上面的发射波长为激发波长，再次得到一个光谱图。在光谱图中，同样有一个最大荧光强度，这个强度所对应的发射波长就是你要找的最佳激发波长。所以会有两条图线，就有两个波长。