一、液氮罐定义及用途

1.液氮罐——具有高真空夹层、超级绝热、用于盛装液氮的低温容器，使用铝制或不锈钢材质制造。

2.使用液氮罐的目的——在液氮温区（-196℃）长期保存和运输生物样本（如：动植物和人体的血样、细胞、jingzi、组织、疫苗、病毒等）。

3.液氮罐使用单位——生物制药实验室、生物医疗研究机构、血库及干细胞库、大型医院、大学研究机构、畜牧研究单位等。

二、液氮罐的分类

1.根据用途可分为三种

液氮贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存，不宜在工作状态下作远距离运输使用；一般口径比较大。

美菱液氮贮存罐

Thermo液氮贮存罐

液氮运输罐为了满足运输的条件，作了专门的防震设计。其除可静置贮存外，还可在充装液氮状态下，作运输使用，但也应避免剧烈的碰撞和震动。一般口径比较小。

美菱液氮运输系列

MVE液氮运输罐lab系列

自增压液氮罐不能存储其他任何东西（液氮除外），产品结构上设置有液氮汽化自增压管道，利用容器外边的热量，使少许液氮汽化产生压力，将液氮输出,可运输。

美菱自增压液氮罐

2.根据液氮状态可以分为液相液氮罐和气相液氮罐

液相液氮罐细胞储存在液氮液面以下，气相液氮罐液氮在罐体外壁，里面是气相，细胞储存在气相里。从外观上看的话，气相液氮罐上有压力表和一些阀门。液相液氮罐细胞储存在液面下，温度为-196度，气相的比他略高，约为-190度。气相液氮罐细胞之间交叉污染的可能性较小。

大型气相液氮罐

三、液氮罐的构造

外壳：液氮罐外面一层为外壳，其上部为罐口

内槽：液氮罐内层中的空间称为内槽，一般为耐腐蚀性的铝合金，内槽的底部有底座，供固定提筒用，可将液氮及样品储存于内槽中。

夹层：夹层指罐内外两层间的空隙．呈真空状态。抽成真空的目的是为了增进罐体的绝热性能，同时在夹层中装有绝热材料和吸附剂。

颈管：颈管通常是玻璃钢材料，将内外两层连接，并保持有一定的长度，在颈管的周围和底部夹层装有吸附剂。顶部的颈口设计特殊，其结构既要有孔隙能排出液氮蒸发出来的氮气，以保证安全，又要有绝热性能，以尽量减少液氮的气化量。

盖塞：盖塞由绝热性能良好的塑料制成，以阻止液氮的蒸发，同时固定提筒的手柄。

提桶：提筒置于罐内槽中，其中可以储放细管。提筒的手柄挂于颈口上，用盖塞固定住

附件：

液氮罐相关配件及耗材主要有液位监控仪、液氮泵、运输车、液位尺、提筒（方提筒、圆提筒）、冻存盒和冻存管等。

四、液氮罐的品牌和选型

进口品牌：

美国MVE

美国热电Thermo

美国泰来华顿(Taylor Wharton)

英国斯帝邦(Statebourne)

英国丹氏（Danclan）

美国Cryosafe

德国KGW

美国 CBS 公司

国产品牌：

美菱、金凤、东亚、亚西、盛杰

五、储存生物样品的临界温度(推荐)

六、液氮罐的质量判断

1.罐子在使用过程中，每天都应随时检查罐子的使用情况，在罐子内有液氮的前提下，发现罐子瓶盖上和上部有水珠或结霜情况，说明罐子质量有问题，应立即停止使用；

2.在罐子瓶盖上和上部无水珠或结霜现象时，用手触摸外壳，感觉上部冷，下部热，说明罐子质量有一些问题，即液氮日增损较大，应注意观察，防止液氮耗损完后，所贮存的物质损坏，必要时，最好停止使用；若上下温度一致，说明罐子质量没有问题。

3.打开瓶塞后，瓶口内的雾气不往外溢，而往下沉，说明罐子是好的。

4.用耳朵从瓶口处听罐子内是否有气泡声，如较频繁则罐子质量有问题，反之则无问题。

七、液氮罐在使用过程中的注意事项

A.安全

为避免冻伤，在充装或取出液氮、储存液氮、转移容器及其他经液氮有降温的任何物品时应非常小心。

• 充装液氮和使用液氮罐时必须在通风良好的环境，须将门窗打开，使空气对流避免引起窒息安全事故；
• 使用环境必须远离热源、易燃品、易腐蚀性气体、强磁场、粉尘和油污严重的场所；
• 使用者必须经过严格的专业培训以确保使用安全；
• 勿让手部任何一处肌肤处于暴露状态；
• 操作时应佩戴安全装备，如：面罩、低温防护手套和低温防护围裙；
• 液氮溅到衣服或安全着装上时，应立即将其脱下；严禁穿长筒靴之类的鞋进行操作，一旦液氮进入鞋内会严重冻伤脚部；
• 不得擅自打开容器保持容器夹层真空的真空封口接头，一旦受损将立即导致容器夹层真空恶化；
• 容器须避免阳光直射，存放在阴凉通风的地方。操作时，房间须打开门窗，通风换气，避免室内缺氧而发生窒息现象；
• 液氮罐与外部连接的管路必须牢固，杜绝液氮跑、冒、漏、滴、溅等现象的发生；
• 严禁使用其它塞盖代替专用塞盖或对罐口进行密闭，以免容器内压增大，而引发安全事故或造成罐体损坏；
• 严禁在产品表面任何部位进行敲击或焊接作业；
• 容器底部装有四个高强度脚轮，方便对容器进行短距离移动，移动时应小心谨慎，切不可猛推猛移，防止碰撞。严禁在凹凸不平的地面进行移动；
• 检查容器内液氮贮存量，可采用液面尺、细木或竹杆插入液氮视其结霜高度（液面高度）的方法，切勿用空心管插入，以免液氮从管内冲出飞溅伤人；
• 容器使用前，建议使用干燥氮气吹洗管路及内部，避免运输过程潮湿空气进入罐体而加入液氮后造成结冰影响正常使用；
• 容器使用较久时间后如需清洗，洗后必须确保罐体管路、内部干燥并冷却至室温后，再进行液氮充入；
• 液氮罐涉及多项专业技术，因而出现故障后，需先与专业工程师进行故障判定，再确认是否将容器返厂进行检查和维修。
  警告：氮蒸汽排放会将空气中的氧气耗尽，可能引起窒息甚至死亡。切勿在空气不流通的区域存放或使用液氮容器。严禁在多雨或潮湿环境使用容器，避免凝结霜或冰，造成排气通道堵塞。

B.急求措施

• 皮肤、衣物接触液氮
  迅速脱去伤者身上沾有液淡的衣服、鞋子、袜子等，使其冻伤部位血液能够循环。将伤者转移到暖和的地方(室温)，用干净自来水或干净微温水连续冲洗冻伤部位。直到冻伤部位皮肤由苍白色转变为粉红色。冲洗后用已消毒且无粘性的布覆盖在冻伤处。若出现严重冻伤或冷烧伤，急救后应立即送到当地医院,并告诉医务人员是由于接触到深冷液体引起的。（注意：冷烧伤的治疗方法与热烫伤很类似，若冷烧伤很严重，应迅速与当地医院联系。不得用热水或采用其它加热方式对冻伤处进行解冻！不得搓揉或按摩冻伤处！解冻期间，不要让病人抽烟喝酒！未经医生同意，不得擅自让伤员吃任何药品。）
• 眼睛接触
  若眼睛接触到液氮应立即翻开病人眼帘，用干净自来水或干净微温水轻轻冲洗眼睛至少15分钟并快速就医。
• 吸入大量氮气
  迅速将受害者转移到空气新鲜流通的地方，并立即安排送往医院进行检查治疗。

C.灌注说明

初次注入液氮及随后添加过程中，为避免损坏容器及不良现象出现，造成真空衰减、丧失或罐体非正常凝水、结冰现象，遵循液氮罐操作手册很重要。

• 确认使用环境空气湿度，如湿度≥80%RH，应使用除湿设备（空调等）降低湿度，一般湿度≤60%RH较宜。
• 确认容器管路和内部是否在运输过程中被水蒸气侵湿，建议使用干燥氮气进行吹出，建议不低于30分钟。
• 通过进液管路将液氮缓慢注入新容器或复温容器中。
• 因*冷却容器，一公斤的重量需要消耗1L液氮，故建议添加有效容积二分之一的液氮进行静置冷却。
• 让液氮在容器中静置2小时以上，使内部*冷却。
• 静置冷却时间后，再将液氮充注至所需液位。
• 切记适当的安全着装：面罩、低温防护手套和围裙。
• 容器中的液氮勿装得过满。溢出的液氮使壳体迅速降温会引起真空嘴组件泄漏，导致真空即使或过早失效。

D.测量液氮量

• 使用专门液位尺或液位计。切勿用带中空的管状物代替测量液氮。
• 液位标高用霜线指示，因为提起液位尺时霜线会形成。

E.计算产品静态液氮日蒸发量

• 根据C节灌注说明进行灌注。液氮充满率不低于50%。
• 灌注静置48小时后第一次记录液氮高度。
• 第一次高度记录3天后进行二次液氮高度记录。
• 静态液氮日蒸发高度=（第一次高度—第二次高度）/两次测量间隔天数。（测试环境温度20℃±3℃和常压情况下进行，否则计算数据与产品实际静态液氮保存期可能存在偏差。）
• 静态液氮日蒸发量=液氮日蒸发体积*液氮密度。
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