质粒大量提取试剂盒的使用注意事项
时间:2024-09-30 阅读:542
质粒大量提取试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的 DNA的特性提取质粒DNA。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附 DNA,可最大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。从 50-100m1大肠杆菌 LB培养液中,可快速提取 200-300 μg纯净地高拷贝质粒 DNA,提取率达 85-90%。使用本试剂盒提取的质粒 DNA可适用于各种常规的分子生物学试验,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚等有毒试剂,操作安全。
质粒大量提取试剂盒的使用注意:
1.在使用前,请检查溶液是否出现混浊或沉淀现象。如有混浊或沉淀,可在适当温度下加热几分钟,待溶液恢复澄清后再使用。
2.溶液在使用后应立即拧紧盖子,以防止被空气中二氧化碳酸化。
3.洗脱缓冲液体积不应过小,否则会影响回收效率。同时,洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,应保证其在适当的范围内。
4.对于低拷贝质粒或大于一定大小的大质粒,应加大菌体使用量,并按照比例增加各溶液的用量。同时,在吸附和洗脱时可以适当地延长时间,以增加提取效率。
5.提取过程中应穿实验服并戴一次性手套操作,以确保安全和健康。