ELISA试剂盒新手入门的使用说明技巧
时间:2015-04-30 阅读:1184
方法原理
1.双抗体(原)夹心法:检测抗原(体)的常见方法,应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载体和酶标抗体检测溶液中的抗原(适用于二价以上抗原,不能测 小分子半抗原)。
2.间接法:检测抗体的方法,利用酶标记的抗抗体(第二抗体)检测已与固相抗原结合的抗体。
3.竞争法:检测抗原或小分子半抗原、抗体,以测抗原为例,使待测抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,结果如待测抗原含量越多,与固相抗体结合的酶标抗原就越少,显色越浅,二者呈负相关。
◎操作注意
① 使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
② 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
③ 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
ELISA试剂盒质控分析
1.人员培训内容包括:①检验项目的基本原理(ELISA试剂盒原理);②熟悉检测技巧,了解易出差错的环节及难点;熟悉检测试剂性能(包括试剂盒组成,包被片段及其组成);③熟悉检测仪器的原理及性能;掌握数据处理的能力和质量控制知识;④某些特殊项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班,考试合格后持证上岗。
2.基本了解
① 1971年Engvall等人把免疫组化的EIA技术应用于临床检验发展为ELISA试剂盒技术。
② 特点:ELISA试剂盒在固相表面组装免疫活性物质形成"免疫吸附剂"。
③ 酶标记免疫活性物质,进行信号放大;
④ 有二步温育反应二次洗涤过程;
⑤ 灵敏度特异性相对较高。
⑥ 局限性:只能检测到ng水平
⑦ 精密度差(批内CV15-20%);
ATG16A 整合素αVβ1抗体
ATG18/WIPI1 整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体
ATG3 整合素αL抗体
ATG4A 整合素αE抗体
ATG4C 整合素α7抗体
ATG4D 整合素α6抗体
ATG7 整合素α5抗体
ATG8/GABARAPL2 整合素α4抗体
ATG9A 整合素α4β7抗体
ATG9B 整合素α3抗体
ATGL/PEDFR 整合素α3β1抗体
ATH III 整合素α2抗体
ATM 整合素α1抗体
ATP citrate lyase 整合素alpha E2 抗体
ATP1b2/Na+K+ATPase 真核延伸因子激酶2抗体
ATP2c1 真核启动因子2α抗体
ATP4B 真核翻译延长因子2抗体
ATP5J 真核翻译起始因子4G抗体
ATP7A 真核翻译起始因子4E抗体
ATP7B 真核翻译起始因子4B抗体
ATRN 真核翻译起始因子3H抗体
ATXN1 真核翻译起始因子3F抗体
AU1 tag 真核翻译起始因子3A抗体
AU5 tag 粘着斑激酶抗体
Aurora A/ARK-1 粘膜血管定居因子抗体
Aurora A/B/C 粘膜相关上皮趋化因子28抗体
Aurora B/STK-1 粘附相关激酶抗体
Aurora C 粘附分子相关蛋白a1抗体
AVEN 粘蛋白-5B抗体
AVPR2 粘蛋白-4抗体
Axin1 粘蛋白-3抗体
AXL 粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗体
B7-1/CD80 粘蛋白-1/上皮膜抗原抗体
B7-DC/CD273 增殖细胞核抗原抗体
B7-H1/CD274 增殖细胞核抗原抗体
B7H4 增殖细胞核抗原抗体
BAAT 增殖细胞核抗原抗体
ELISA试剂盒 BACE1/ASP2 增殖潜能相关蛋白抗体
BACH1/BRIP1 增食欲素-A/欲激素A
Bad 增生肉蛋白1抗体
Bad 造血细胞磷酸酶抗体
BADH2 造血细胞激酶抗体