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ELISA试剂盒新手入门的使用说明技巧

时间:2015-04-30      阅读:1184

方法原理
  1.双抗体()夹心法:检测抗原()的常见方法,应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载体和酶标抗体检测溶液中的抗原(适用于二价以上抗原,不能测 小分子半抗原)
  2.间接法:检测抗体的方法,利用酶标记的抗抗体(第二抗体)检测已与固相抗原结合的抗体。
  3.竞争法:检测抗原或小分子半抗原、抗体,以测抗原为例,使待测抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,结果如待测抗原含量越多,与固相抗体结合的酶标抗原就越少,显色越浅,二者呈负相关。
◎操作注意
  使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
  洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
  底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
ELISA试剂盒质控分析
  1.人员培训内容包括:①检验项目的基本原理(ELISA试剂盒原理);②熟悉检测技巧,了解易出差错的环节及难点;熟悉检测试剂性能(包括试剂盒组成,包被片段及其组成);③熟悉检测仪器的原理及性能;掌握数据处理的能力和质量控制知识;④某些特殊项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班,考试合格后持证上岗。
  2.基本了解
    1971Engvall等人把免疫组化的EIA技术应用于临床检验发展为ELISA试剂盒技术。
    特点:ELISA试剂盒在固相表面组装免疫活性物质形成"免疫吸附剂"
    酶标记免疫活性物质,进行信号放大;
    有二步温育反应二次洗涤过程;
    灵敏度特异性相对较高。
    局限性:只能检测到ng水平
    精密度差(批内CV15-20%)

 ATG16A  整合素αVβ1抗体
 ATG18/WIPI1  整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体
 ATG3  整合素αL抗体
 ATG4A  整合素αE抗体
 ATG4C  整合素α7抗体
 ATG4D  整合素α6抗体
 ATG7  整合素α5抗体
 ATG8/GABARAPL2  整合素α4抗体
 ATG9A  整合素α4β7抗体
 ATG9B  整合素α3抗体
 ATGL/PEDFR  整合素α3β1抗体
 ATH III  整合素α2抗体
 ATM  整合素α1抗体
 ATP citrate lyase  整合素alpha E2 抗体
 ATP1b2/Na+K+ATPase  真核延伸因子激酶2抗体
 ATP2c1  真核启动因子2α抗体
 ATP4B  真核翻译延长因子2抗体
 ATP5J  真核翻译起始因子4G抗体
 ATP7A  真核翻译起始因子4E抗体
 ATP7B  真核翻译起始因子4B抗体
 ATRN  真核翻译起始因子3H抗体
 ATXN1  真核翻译起始因子3F抗体
 AU1 tag  真核翻译起始因子3A抗体
 AU5 tag  粘着斑激酶抗体
 Aurora A/ARK-1  粘膜血管定居因子抗体
 Aurora A/B/C  粘膜相关上皮趋化因子28抗体
 Aurora B/STK-1  粘附相关激酶抗体
 Aurora C  粘附分子相关蛋白a1抗体
 AVEN  粘蛋白-5B抗体
 AVPR2  粘蛋白-4抗体
 Axin1  粘蛋白-3抗体
 AXL  粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗体
 B7-1/CD80  粘蛋白-1/上皮膜抗原抗体
 B7-DC/CD273  增殖细胞核抗原抗体
 B7-H1/CD274  增殖细胞核抗原抗体
 B7H4  增殖细胞核抗原抗体
 BAAT  增殖细胞核抗原抗体
ELISA试剂盒 BACE1/ASP2  增殖潜能相关蛋白抗体
 BACH1/BRIP1  增食欲素-A/欲激素A
 Bad  增生肉蛋白1抗体
 Bad  造血细胞磷酸酶抗体
 BADH2  造血细胞激酶抗体


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