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蛋白印迹膜再生液实际操作技巧和注意事项

时间:2021-03-17      阅读:6952

蛋白印迹膜再生液说明书

Stripping Buffer

目录号:K0056

保存条件:室温(15-25℃)保存。

 规格说明

 Cat. No.  K0056      K0056A

Volume     100 ml      500 ml   

 产品简介

  本产品采用温和洗涤配方,可在不影响目的蛋白的情况下,去除结合在印迹膜上

的一抗和二抗,使同一张膜可进行多次抗体检测,无需反复电泳和转膜,节省样品和

时间,适用于使用NCPVDF膜进行Western Blot检测时条件的优化或同一样品不同蛋

白的检测。

 本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途    

 注意事项

 1.建议先检测表达量较低的目的蛋白,用再生液处理后检测表达量高的蛋白,如内参蛋白等。

2.请佩戴手套操作。

 操作步骤

 1.将曝光后的膜取出,加入适量的再生液(再生液充分覆盖膜表面,8.5 cm×5.5 cm膜加入15  ml左右再生液),室温振摇孵育15分钟左右(孵育时间应根据不同的目的蛋白来调整:比如内参抗体等表达量较高的蛋白,使用再生液时可以延长孵育时间至1小时或者在37℃孵育30分钟)。

2.弃去再生液,用15 ml缓冲液(PBSTTBST)洗膜3次,每次5 分钟,室温振摇。

3.为了检测酶标二抗洗脱是否*,此时可以用显色方法来确定二抗是否洗脱掉。

4.待检测完毕,确认膜上无残留的酶活性,再生后的膜通过加入15 ml的封闭液进行封闭,室温30分钟或者4℃封闭过夜。

5.重新加入待测一抗,进行下一轮的WB实验。

 

实验代做服务:

 

WB代做

HE染色

免疫荧光染色

蛋白相互作用分析

ELISA免费代检测

免疫组化

荧光定量PCR

番红O固绿染色

流式细胞检测

激光共聚焦

透射电镜服务

DNA甲基化实验

免疫共沉淀(Co-IP

DNA甲基化

扫描电镜实验

microRNA 测序

半定量RT-PCR

分子克隆和质粒载体构建服务

原位杂交(FIsh

石蜡/冰冻切片

RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP

CCK8检测

蛋白双向(2-D)电泳

蛋白双向2D-WB

ATP/ADP检测

Taqman探针

细胞划痕

基因组DNA提取

 

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