上海研域生物给您普及人ELISA检测试剂盒操作流程：

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

人ELISA检测试剂盒注意事项：

1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

2、各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

3、请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。

4、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5、底物请避光保存。

6、严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

7、所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

8、本试剂不同批号组分不得混用。

9、如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

研域（上海）化学试剂有限公司宗旨是为了中国生命科学事业的腾飞，我们全力以赴，以更好的品质、更优惠的价格、更专业的技术服务好每一位客户的需求。