在操作Elisa试剂盒实验前，不少老师会找寻很多的相关实验资料，网上的资料一大堆，然而真正所能够需要用到的技巧和注意也就那几条，熟练的了解并掌握之后再应用到实验中就会简单的多。

一、加样的经验总结

加样或加试剂时，请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，个孔与一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间控制 在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。 

二、孵育的三条必知

1.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标 板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发。

2.洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态。

3.同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

三、反应时间的控制

加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔 10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 

四、ELISA洗涤小技巧

洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直 接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响*后的酶标仪读数。 

五、操作说明 

1. 封板膜只做一次性使用。 

2. 标本中待测物质含量过高时先将样本稀释一定倍数后再测定，计算时请乘以稀释倍数。

3. 各步加样均使用加样器，并经常校对其正确性，一次加样时间控制在5分钟内（标本数目多的时候，上海上海研域生物推荐使用排枪加样）。

4. 液体标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

研域（上海）化学试剂有限公司总部设在上海，公司专业经营生命科学领域的研究试剂、实验室消耗品等，我们致力于向国内外生命科学研究人员提供的产品和技术服务。