一、仪器简介及使用范围:

      生物化学需氧量BOD5是水质评价的必测项目，是衡量有机物对水质污染的重要质量指标。传统BOD5的测定方法采用化学稀释法。该方法操作繁琐，对分析人员的实验技能要求较高，实验数据的离散性较大，往往造成无法得出准确的实验结果。

     CY-II型直读式BOD5测定仪是利用空气压差法进行生化需氧量测定的一种新型仪器，其操作简单，能提供与化学稀释法可比的准确测量结果，读数直观，使用和维护方便。广泛应用于环保监测、石油化工、医疗卫生、教学科研等部门对水质的监测，是广大分析工作者的有力工具。

二、工作原理:

     1、B0D5基本原理定义生化需氧量（BOD5）定义为水中需氧微生物消耗溶解氧的量，当样品放在培养箱中，培养温度为20℃养五天时，测定所消耗溶解氧的含量来确定水样的BOD5值。

　　生化需氧量（英文缩写BOD），是指在特定条件下，通过水中需氧微生物的繁殖和呼吸作用，分解水中有机物质时所消耗或所需要溶解氧量。水中的BOD5值通常以样品在20℃放置5天所消耗溶解氧的量（mg/L数）表示，记为“BOD5”。

    2、测定原理将预先选好量程并按量程范围量好体积的水样倒入培养瓶中，在主机搅拌器上连续搅拌。并将主机和培养瓶放入培养箱中。调节培养箱内温度为20℃±1℃，待样品恒温后进行五日培养。培养瓶中的水样在连续搅拌的情况下保证了足够的溶解氧供微生物进行生化反应。水样中的有机物经过生物氧化作用，转变成氮、碳和硫的氧化物。在这一过程中，从水样中溢出的气体二氧化碳被氢氧化钠（或氢氧化钾）吸收。此时，培养瓶中空气压力减少量，相当于微生物所消耗的溶解氧含量，即水样BOD5值与瓶中空气压力减少的程度成正比，所以BOD5的值可以由空气压力减少值来测定，增加或减少所取样品的量可以增加或降低压力减少值。这样操作者就能准确测量很宽范围的BOD5值。培养瓶中空气压力的变化是通过压力计中汞柱高度的变化来进行检测的，通过简单的计算即能读出水样的BOD5值。

三、主要技术指标

1、环境温度：0℃～40℃

2、测定方法：差压法

3、测量范围：0mg/L～1000mg/L（BOD5值超过测量范围时需要稀释）

4、批处理量：每次8份水样

5、准 确 度：符合国标“GB7488-87”标准规定（葡萄糖谷氨酸标液BOD5值在180mg/L～230mg/L范围内）

6、显    示：从压力计刻度尺上可直读出样品BOD5值（mg/L）

7、培养温度：20℃±1℃

8、电    源：DC12V

9、主机尺寸：400mm×270mm×350mm

10、主机重量：5kg11、功    耗：仪器18W

四、仪器的组成本仪器由BOD测定装置主机、BOD培养瓶、配件盒及生化培养箱组成。

五、安装和使用

（一）本仪器的安装环境条件：

1、温度：0℃～40℃2、湿度：≤80％

（二）仪器部件说明

    1、搅拌子    2、压力计管     3、旋钮       4、培养瓶      5、水样6、刻度尺    7、NaOH（固）   8、密封杯     9、培养瓶盖    10、接头11、连接管   12、水柱盖      13、密封圈    14、水柱       15、水     16、汞       17、密封管主机在实验时，主机放入培养箱内，主机内有8只磁力搅拌器，实验过程中它带动培养瓶内的搅拌子对水样进行搅拌，以促进培养瓶内空气中的氧气溶解于样品液中，保证在整个实验过程中，水样中的微生物有足够的溶解氧进行生化反应。

  2、BOD培养瓶样品放人培养瓶中进行生化培养，该培养瓶经过筛选处理，各台仪器之间一般不可互换，亦不容许用其它类似的瓶代替。

（三）准备工作

      1、开箱检查，按装箱清单核对主机、培养瓶、配件盒及生化培养箱是否齐全。

　　2、检查实验用电源，应为交流220V±22V，频率50Hz±0.5Hz。

　　3、为确保安全和仪器工作正常，仪器应有可靠的接地线。

（四）仪器安装（如图2）图21、搅拌子    2、压力计管     3、旋钮       4、培养瓶     5、培养液6、刻度尺    7、NaOH（固）   8、密封杯     9、培养瓶盖   10、接头11、连接管   12、水柱盖      13、密封圈    14、水柱      15、水16、汞       17、密封管      18、注射器灌水银：用注射针筒将装置中附带的水银分别装到八个水银瓶中。

步骤为：拧开水银瓶盖，用针筒分别小心地对八个水银瓶灌入1.6～1.8ml水银，再分别注入1-2ml蒸馏水以防水银蒸发。调整水银压力计零点：用胶吸球（洗耳球）将压力计的水银柱吸到满标尺，然后松开吸球让其自由下降，正常时水银柱降至一定位置时应有回跳一两次的现象，显得较灵活，若水银柱下降较慢且平稳无回跳现象，可能水银中有杂物或水银中夹有气泡，应设法清除，对于水银加的气泡可用洗耳球将水银柱压入后反复多次吸上放下，直至将气泡排除为止，八条水银柱高低应基本一致且活动灵活。

六、分析方法及分析步骤

（一）四种无机盐的制备1、缓冲液用蒸馏水溶解下列试剂并稀释至1升。

　　（1）21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）。

　　（2）8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）。

　　（3）33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7 H2O湿度在61.07％～80.51％稳定）。

　　（4）1.7g氯化铵（N H4Cl）。

　　2、硫酸镁溶液在蒸馏水中溶解22.5克硫酸镁（MgSO 4·7H2O）并稀释至1升。

　　3、氯化钙溶液在蒸馏水中溶解27.5克氯化钙（CaCl2）并稀释至1升。

　　4、三氯化铁溶液在蒸馏水中溶解0.25克三氯化铁（FeCl3·6H2O）并稀释至1升。

　　★制备无机盐溶液所使用的蒸馏水不应含有微生物生长抑制剂（如碱、无机酸、余氯和重金属）。

（二）实际样品BOD 5的测量

    1、接通培养箱电源，将培养箱上温度设置显示温度为20℃，保持温度为20℃。把主机放在培养箱上，将BOD主机电源线的一端插入仪器后部插座上，另一端插入培养箱内对应插座上，打开仪器电源开关，仪器前侧电源指示灯亮，8只搅拌器正常搅拌。

　葡萄糖——谷氨酸标准样品BOD5试验方法如下：

　　1、制备稀释水取1只2000mL烧杯，用量筒量取2000mL蒸馏水倒入烧杯中，在烧杯中加入四种无机盐各2mL。

　　2、将制备好的稀释水倒出约200mL用于溶解300mg葡萄糖（C6H12O6）和300mg谷氨酸（如实验室用葡萄糖带一个结晶水，葡萄糖称量330mg，这种标准溶液应在每次使用前新鲜配制），溶解后再倒入盛有稀释水的烧杯中。在烧杯中放一搅拌子，烧杯放在培养箱内主机上恒温搅拌2～3小时。

　　3、用1000mL烧杯取新鲜的生活污水作为接种液，把烧杯放在培养箱内的主机上与标准样品同时恒温2～3小时。

　　4、待标准样品全部溶解后，按10％接种，用量筒倒出200mL，再用量筒取200mL生活污水倒人标准样品中，将接种后的标准样品仍放在培养箱内搅拌器上恒温搅拌1～2小时。

　　5、按说明书表格中0～300mg/L量程规定的取水样量量取接种后的标准样品，分别倒人7个培养瓶中，另一个培养瓶按0～100测量范围取接种水进行平行测定。

　稀释CY-II型直读式BOD5测定仪测定范围为0～1000mg/L。如果试验样品的BOD5估计值高于1000mg/L可用稀释水稀释样品。所加入的稀释水也应保持为20℃，并曝气使氧达到饱和，如需要若干份相同的样品试验时，应稀释足够量的原水样，并从稀释样中取出与量程对应的体积。例如，当试验原水样稀释两倍时，稀释倍数为2；当原水样按1:10稀释时，则应为10，所测结果应乘上稀释倍数。

      接种什么是接种BOD5实验要求水样含有供生物氧化的有机物和适量的氧化有机物的需氧细菌，以及吞食有机物和增进需氧细菌生长的其他微生物。如果水样中根本没有或几乎没有这类微生物，就必须对水样按一定比例加入这类微生物溶液。这个过程应称之为接种。

　　与生活污水不同，工业废水可能不含有足够量的细菌以供样品中所含有机物*的生化分解，如果所测定的样品为这种废水，应加入接种溶液。

　　接种方法制备接种溶液接种溶液用于接种的溶液为20℃放置24～36小时的未经处理新鲜生活污水的上清液。

　　在下次实验中，若要使用以前测定过的水样作为接种液应经滤纸过滤，这种滤液在冷藏（约20℃）、避光的条件下保存，一般在一个月内是有效的。

　　将准备测定的样品放入培养瓶中，使用吸管将一定量的接种液加入到样品中（根据样品量）。按步骤测定BOD5，五日后获得的读数可以作为试验样品真实的BOD5值。