关于液相色谱仪色谱柱使用及维护

点击次数：68 发布时间：2015/7/24

液相色谱仪色谱柱使用及维护

使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。 
     
     卡套柱的安装（加预柱）
     1．将卡套架套入柱芯
     2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见下图）
     3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片
     4．将"预柱放入卡套片内
     5．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧
     6．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端
     　　平衡色谱柱 
     　反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。
     　　硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡
     　　如何平衡色谱柱？ 
     　　平衡过程中，将流速缓慢地提高
     　　用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡）
     　　色谱柱的再生 　　进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议不使用您的液相色谱仪上的泵。 
     　　 表1　建议用来冲洗的溶剂体积
     　　 注意：
     　　 
     在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液*流出。 
     
     　　 **如果简单的有机溶剂/水的处理不能够*洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
     　　 色谱柱的维护 
     　　 1．使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）
     　　 2．大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围
     　　 3．避免流动相组成及极性的剧烈变化
     　　 4．流动相使用前必须经脱气和过滤处理
     　　 5．如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存大乙腈中
     　　 6．压力升高是需要更换预柱的信号