高效液相色谱仪(HPLC)是分析实验室常用的测试仪器之一，其应用越来越广泛。此种仪器在使用过程中，难免会出现各种各样的问题，并将直接影响到所测数据的准确性和仪器的正常工作。操作者如果能了解故障的成因，即可清楚预防和排除这些故障的发生，就可正确地使用仪器并最大限度地发挥仪器的性能。

　　1.基线漂移偏大

　　(1)柱温波动:控制好柱子和流动相的温度。

　　(2)流通池被污染或有气泡:用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。

　　(3)检测器出现阻塞，高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线:取出阻塞物或更换管子，更换流通池窗需参考检测器手册。

　　(4)柱平衡慢:特别是流动相发生变化时，用中等强度的溶剂冲洗，提前预约客户，在分析前用10～20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。

　　(5)流动相污染、变质或由低纯度溶液配成:使用高品质的化学试剂及高效液相色谱(HPLC)级的溶剂。

　　(6)样品中有强保留的物质(高K′值)以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线:使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，用强溶剂冲洗柱子。

　　(7)流动相不均匀、配比不当或流速有变化:在配制流动相时应充分摇匀，同时要根据目标分离物和流动相的极性合理配比，并保持流速恒定。

　　(8)柱子平衡时间短:HPLC色谱柱根据使用环境不同，平衡时间通常要控制在(30～60)min。

　　(9)检测器没有设定在最大吸收波长处:检测器没有设定在最大吸收波长处不仅影响检测器的灵敏度和结果的准确度，还会使基线漂移加大，应该将检测器设定在最大吸收波长处。

　　2.噪声偏大

　　(1)在流动相、检测器或泵中有空气:流动相脱气，并冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。

　　(2)管路漏液:检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。

　　(3)流动相污染、变质或有低纯度溶液配制:使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。

　　(4)温度差异影响(柱温过高，检测器未加热):减少差异或加上热交换器。

　　(5)在同一条线上有其他电子设备:断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。

　　(6)检测器/ 记录仪电子元件的问题:断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。

　　(7)泵震动:在系统中加入脉冲阻尼器。

　　(8)检测器灯能量不足:更换灯。

　　(9)色谱柱填料流失或阻塞:更换色谱柱。

　　3.重复性偏大

　　(1)峰型不佳(如峰拖尾、峰宽较大、分裂峰等都不利于峰面积的计算，造成重复性偏大):可以改变色谱柱条件，改变温度、流速等参数，以获得较尖锐的峰型，利于保证积分的准确性。

　　(2)泵流速不稳:可以根据泵流速检定情况作出判断，泵流速的稳定性对峰面积的重复性影响非常大。例如:在其他条件不变的情况下，将流速由1.0mL/min改为0.5mL/min，结果保留时间加倍，峰面积也加倍，也可以看出峰面积在一定条件下基本与流速成反比。

　　(3)色谱柱影响:色谱柱固定相的流失，以及色谱柱对标样的吸收等都会影响检测结果；特殊情况下还会发生柱子对样品的不可逆吸收，建议使用替代柱。

　　(4)柱温有变化:柱温对保留时间有显著影响，保留时间的变化直接影响积分面积的大小。因此应保持柱温恒定。

　　(5)进样器漏液:进样器漏液导致进入色谱柱的样品量发生变化，进而导致峰面积发生变化，应检查进样垫等易损部件以排除漏液。

　　(6)样品本身的影响:样品降解或溶剂挥发都会导致重复性偏大，应确定方法的准确性和采取措施控制挥发。