HGC-27细胞,人未分化胃癌细胞操作步骤
时间:2024-10-31 阅读:237
在继续探讨HGC-27细胞,即人未分化胃癌细胞的操作步骤时,我们需细致入微地确保每一步的精确性和无菌操作的重要性。
首先,进行细胞复苏时,需快速将冻存的HGC-27细胞从液氮中取出,并迅速置于37℃水浴中轻轻摇晃,确保细胞在1分钟内融化。随后,将细胞悬液转移至预装有培养基的离心管中,轻柔混匀后离心,去除上清液,再加入新鲜培养基重悬细胞,接种至培养瓶中,置于37℃、5% CO2的恒温培养箱中培养。
细胞传代时,待细胞长至80%-90%融合度,弃去旧培养基,用PBS清洗两次后,加入适量胰酶消化细胞,待细胞变圆、间隙增大时,加入培养基终止消化,吹打制成细胞悬液,按一定比例分至新的培养瓶中继续培养。
此外,细胞冻存也至关重要。选择对数生长期的细胞,按上述方法消化、离心后,用细胞冻存液重悬细胞,调整细胞密度至适宜范围,分装至冻存管中,标记好细胞名称、冻存日期等信息后,按梯度降温法逐步冷冻,最终置于液氮中长期保存。
在整个操作过程中,严格的无菌操作、精准的细胞计数以及适时的培养基更换,都是确保HGC-27细胞健康生长和实验成功的关键。