1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂. 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染.
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 "预孵育"时间，从而明显地影 响到测量值的准确性及重复性.一次加样时间(包括标准品及所有样品)控制在 10 分 钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样.
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给定的孵育时间和温度.
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响zui后的酶标仪读数.
5. 试剂配制：Detection A 及 Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或 瓶盖的液体沉积到管底.标准品，检测溶液 A 工作液，检测溶液 B 工作液请依据所需的量 配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆.
请配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液 A 时，一次不要小于 10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓 度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品，检测溶液 A 工作液或检测溶液 B 工作液.
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔 10 分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数.
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数.