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巨噬细胞去除实验

时间:2013-07-09      阅读:9744

 去除巨噬细胞是研究巨噬细胞功能的重要方法。巨噬细胞可吞噬clodronate Liposome,在溶酶体的作用下,clodronate可释放出来,当其达到一定浓度时,可引起巨噬细胞的凋亡,从而去除巨噬细胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位临近的巨噬细胞,如肺、膝关节、肿瘤局部和脑等;也可尾静脉或腹腔注射去除循环途径中的单核巨噬细胞,如肝脏和脾脏中的巨噬细胞。

 

1.       脂质体的准备

美国的FormuMax Scientific可以提供多种clodronate Liposome 具体产品可以上http://www.liposomeexpert.com查询,他们中国代理商是上海起福生物科技有限公司

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2.       脂质体的体内注射

隔日尾静脉注射200ul clodronate liposome,根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化或流式检测巨噬细胞的去除效率。

 

尾静脉注射方法:

1.       将小鼠放在倒扣的饭盒内,从孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉;

2.       将纱布浸泡于约70度的温水中,拿出后包裹尾巴,以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的;

3.       行尾部静脉注射时,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出约2cm一段,使皮肤紧张,静脉更为充盈,右手持1ml针头注射器,使针头与静脉平行小于30°,从尾巴的下1/4处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,可正式注入药物。

有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部移动,更换血管位置注射给药。拔出针头后,用棉球按住注射部位轻压1-2min,止血。

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