1包被缓冲液，

（1）碳酸盐缓冲液（PH9.6 +0.2  0.05M） 《激素酶免疫测定技术》石老师编著

　          Na₂CO₃1.59g

　　　　　　NaHCO₃　       2.93g

加蒸馏水至1000ml。

（2）tris缓冲液（0.05mol/L）50ml 0.1mol/L

（Tris）溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后，加水稀释至100ml        《酶免疫测定技术》杨立国等编著

某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：ml）的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml

3）0.02mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）

磷酸二氢钾        0.2g

磷酸氢二钠        2.90g

氯化钠            8g

加去离子水定容到1000ml。

2洗涤缓冲液（pH7.4   0.15mol/L）   《激素酶免疫测定技术》石老师编著

0.05%Tween-20       0.5ml

加在PBS缓冲液1000ml中。

PBS缓冲液：

　　　　　　KH₂PO₄ 　　         0.2g

　　　　　　Na₂HPO₄·12H₂O　　  2.9g

　　　　　　NaCl　 　            8.0g

　　　　　　KCl　　             0.2g

　　　　加蒸馏水至1000ml。

3测定缓冲液（Ph7.0  含0.87﹪NaCl 和0.1﹪BSA的0.1M磷酸缓冲液）用于标准孕酮，孕酮酶标物及奶样的稀释。   《激素酶免疫测定技术》石老师编著

        Na₂HPO₄·12H₂O    21.85g

         NaH₂PO₄·2H₂O      6.08g

         NaCl               8.70g

BSA               1.00g

溶于1000mL蒸馏水中

4封闭缓冲液

牛血清白蛋白（BSA）   2%    2g

　　　　　　（或5%脱脂奶粉）加洗涤缓冲液100 ml。

0.05mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.6）+2.0%BSA

2.0gBSA加配好的0.05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量至100ml

5底物缓冲液（pH5.4）磷酸盐-柠檬酸缓冲液

     0.2M  Na₂HPO₄（无水28.4g/L，带12结晶水71.7g/L） 取25.7ml

　　 0.1M  柠檬酸（无水19.2g/L，带1结晶水21.01g/L）   取24.3ml

　加蒸馏水至100ml。

或

柠檬酸（C6H8O7·H₂O）    0.47g

Na₂HPO₄·12H₂O               2.00g

6（1） TMB（四甲基联苯胺）显色液（蓝色）

A液（3，3’，5，5’-四甲基联苯胺，TMB）:称取TMB20mg溶于10ml无水乙醇中，*溶解后，加双蒸水至100ml。

B液（0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢二钠缓冲液，pH5.0-5.4）:称取Na₂HPO₄·12H₂O14.34g，柠檬酸1.87g溶于180ml双蒸水，加0.75%过氧化氢尿素1.28ml，定容至200ml，调pH至5.0-5.4。

将A液和B液按1：l混合后即成TMB-过氧化氢尿素应用液

或

TMB（2mg/ml水）          0.05ml

　　　　    底物缓冲液      　　　   0.95ml

　　　　    30%  H₂O₂　　 　       0.001ml

            总体积1ml。

（2）OPD（邻苯二胺）显色液（黄棕色）（现配避光）

  OPD（干粉）             0.004g

  底物缓冲液                10ml

  30%  H₂O₂                    0.015ml

 总体积10ml。

（3）TMBS底物液（用于显色）  《激素酶免疫测定技术》石老师编著

10mg四甲基联苯胺硫酸盐（TMBS）的二甲基亚砜溶液，用底物缓冲液配成0.2mg/ml的TMBS底物液。用前加H2O2溶液30﹪左右。

7  终止液  2mol/LH2SO4   用于终止反应

　在178.3ml水中，逐滴加入浓硫酸（18M，约98%）21.7ml，边加边摇。（浓H2SO4：蒸馏水=1:9）

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