如何利用流式细胞仪检测细胞周期
时间:2014-11-22 阅读:3158
根据这样的染色方法而定,原理都是先打孔再染色,因为PI没有穿膜作用。所以不同就在打孔的方法上。现在基本有两种方法,一种就是乙醇固定。70-75%浓度效果都差不多,优点是作用比较轻柔,可长时间固定,一般一个月都没问题,更长时间我没试过。适用于不能预计上机时间的朋友,可以先固定好几批细胞然后再一起染色上机。缺点就是打孔时间较长,至少过夜才能保证打孔效果。
另一种就是用Triton打孔,这种方法比较激烈。优点是速度快,消化以后可以马上打孔染色上机,而且不使膜蛋白变性,不容易造成粘连。缺点就是不能长时间保存样品,一般好半个小时内检测,不然时间越久细胞DNA含量的离散度越高,图像越难看。不过现在很多厂家的试剂盒都是用这种快速打孔的方式。
膜通透性改变以后酶可以进去。