高效液相色谱仪使用时会遇到的问题有以下几点!
时间:2020-10-31 阅读:2586
高效液相色谱仪使用时会遇到的问题有以下几点:
1. 色谱柱中的流动相会排干吗?
如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排 入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。相比之下,另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,整个色 谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了,可以尝试用一种*脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶 剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被*浸润,恢复到正常状态。
2. 使用PEEK管路和接头需要注意什么问题?
如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接;PEEK接头不仅无需工具,手拧即可固定,而且容易调节锥箍之外的管路长度,方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。
使 用此类材料的管路需要注意的是:PEEK对卤代烷烃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象,但PEEK遇到上述溶剂会 变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过 3000psi)。
使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能,因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管,因而压力太高时,可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。
3. 如何预防液相泵的故障?
要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:
1.用高质量试剂和HPLC级溶剂;
2.过滤流动相和溶剂;
3.脱气;
4.每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;
5.不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;
6.定期更换垫圈;
7.需要时加润滑油;
8.查阅有关泵操作手册中的其它建议。