关于双目生物显微镜对组织块体积的说明
时间:2016-01-22 阅读:1009
生物显微镜一个非常重要的问题是在取材和分离细胞过程,冰冻干燥和树脂包埋(FD)后冰冻超簿团片后,冰冻干燥后细跑各部位65元素成分含量中处理十分仔细,绝不能损伤待观察分析的细胞。因为作x线微区分析不但步骤繁多,而且成本甚高,如果经过长时间及多步骤的处理后,所分析的细胞是受损伤的细胞或死细胞,得出错误的结论是非常遗憾的。如经过胶元酶处理分离出的心肌细胞有两种形态,一种是长杆状,另一种是圆形。后者是在细胞分离过程中受损伤的濒死细胞。
生物显微镜这两种细胞中电解质的含量及分布十分不同。圆形心肌细胞中Na甚高而K极低,线枝体中的ca浓度十分高。经过与其它分析方法核对,证明圆形细胞高Na低K及线粒体内高ca是由于在细胞分离过程中细胞膜受损伤的结果。细胞及组织的冰凉固定方法往往是先采取淬冷固定,然后放入液氮中保存。淬冷固定对于保存的效果十分重要。活细胞或鲜组织中富含水分,当淬冷时往往是细胞或组织与碎冷剂(特别是用液氮粹冷时)直接接触的部位先冷冻固定,因而形成一个“壳”,便妨碍了细胞的中心部位碎冷固定。因此在作x一线微区分析时,常常发现较大的细胞的中心部位有冰晶存在。为了防止这种情况发生,便使用熔点比液氮高但低干一806c的物质作碎冷剂。这类物质很多,但zui易获得,价格低廉的是浓态丙烷(沸点一42.120c,熔点一187.10c,分子量44.1),冷却速度也zui快。但其缺点是易燃。