纯化是药物开发的关键步骤，从分析到放大再到工艺，纯化和鉴定是将药物推向市场的重要步骤。因此必须有一个高通量的解决方案，以提供足够量的纯化化合物。而 Advion Interchim Scientific 制备色谱系统可以轻松实现活性药物成分(API)与其杂质的分离，达到纯化的目的。

案例分享

使用AIS puriFlash®5.250制备系统，对非处方药(OTC)中的五种活性成分进行了纯化，包括Caffeine、格拉法宁、酮洛芬、黄酮和非诺贝特（图1），同时使用expression® CMS小型台式质谱仪同步确认化合物ID。

1.Caffeine：Caffeine是一种具有兴奋作用的天然化学物质，存在于咖啡、茶、可可等中。

2.格拉芬宁：格拉芬宁是一种非甾体抗炎药(NSAID)，由于过敏反应的高风险，1991年撤出市场。

3.酮洛芬：一种非甾体抗炎药(NSAID)，酮洛芬用于治疗炎症、肿胀、僵硬和关节疼痛。由于增加了心脏病发作、中风、刺激和其他问题的风险，该药于1995年停产。

4.黄酮：植物中普遍存在的一种代谢物。

5.非诺贝特：一种处方药，用于降低和治疗血液中的高胆固醇和甘油三酯（类脂物质）水平。

实验过程

LC分析条件

流动相A：Water + 0.1% TFA

流动相B：Acetonitrile

色谱柱：Aquity UPLC BEH C18 1.7μm, 50x2.1mm ID 

流速：1mL/min

上样方式：液体上样

上样量：1μL

检测波长：UV254nm

洗脱条件

LC分离结果

制备条件

系统：puriFlash® 5.250+iELSD 

流动相A：Water

流动相B：Acetonitrile

色谱柱：US5C18HQ-150/300 

流速：32mL/min

上样方式：液体上样

上样量：0.5mL

粗样：50mg 

洗脱条件

实验结果

下图分别显示了UV Scan (绿色)，ELSD (35°C) (蓝色)，TIC 160-500m/z，XIC 371-374 m/z，XIC 220-224m/z (紫色)的数据图，可以看到五种物质得到了很好的分离，并在质谱上进行了确认。

结论

1、    Advion Interchim Scientific expression®CMS 小型台式质谱仪对分离得到的化合物进行鉴定，可以快速、准确地识别出感兴趣的化合物。

2、   Advion Interchim Scientific采用集成式iELSD与puriFlash® 5.250纯化制备系统为一体，可实现无紫外吸收的样品的检测。