核酸(Nucleic acids)的检测
时间：2024-10-31 阅读：117
核酸是脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的总称，是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。核酸是一类生物聚合物，是所有已知生命形式不可少的组成物质，是所有生物分子中最重要的物质，广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。
上海汉尧实验室（上海星瀚耀生物医药科技有限公司）选用YMC-Triart C18(250*4.6mm, 5um)色谱柱对核酸进行HPLC测定，检测需求。
方法来源：分析实验室自研
样品信息
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| 中文名：胞苷酸(CMP) | 中文名：二磷酸胞苷(CDP) | 中文名：三磷酸胞苷(CTP) |
| 英文名：Cytidine 5'-monophosphate | 英文名：Cytidine-5'-diphosphate | 英文名：Cytidine-5'-triphosphate |
| CAS号：63-37-6 | CAS号：63-38-7 | CAS号：65-47-4 |
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| 中文名：腺苷酸(AMP) | 中文名：二磷酸腺苷(ADP) | 中文名：三磷酸腺苷(ATP) |
| 英文名：Adenosine 5'-monophosphate | 英文名：Adenosine 5'-diphosphate | 英文名：Adenosine 5'-triphosphate |
| CAS号：61-19-8 | CAS号：58-64-0 | CAS号：56-65-5 |
色谱条件
色谱柱：YMC-Triart C18, 250*4.6mm, 5um, P/N: TA12S05-2546PTH
流动相A：70mM NaH2PO4(pH5.5)
流动相B：MeOH
检测波长：260nm;
柱 温：35℃;
进样浓度：1.0mg/ml
稀释剂：H2O
进样量：5μL
运行时间：15min
后运行时间：5min
洗脱梯度：
| T(min) | MP-A% | MP-B% | Flow(ml/min) |
| 0.00 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
| 5.50 | 94.5 | 5.5 | 0.5 |
| 5.51 | 94.5 | 5.5 | 1.5 |
| 12.50 | 84.0 | 16.0 | 1.5 |
| 12.51 | 60.0 | 40.0 | 1.5 |
| 14.50 | 100.0 | 0.0 | 1.5 |
| 14.51 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
| 15.00 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
实验谱图和数据
样品检测谱图
样品检测数据
结论
选用YMC-Triart C18(250*4.6mm, 5um)色谱柱对核酸进行HPLC测定，通过调节流动相梯度及流速，6种核酸在同一色谱条件中可实现稳定分离，且分离度均大于1.5，符合检测需求。