全血/组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒

Rapid Genomic DNA Kit

产品信息：

保存条件：本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。RnaseA、蛋白酶 K 可室温运输，建议-20℃长期保存。

 产品介绍：

*的结合液/蛋白酶 K 迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA 从硅基质膜上洗脱。

 产品特点：

1.重复性好:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2 提取纯度高，OD₂₆₀/OD₂₈₀ 典型的比值达1.7～1.9，可直接用于PCR，Southern-blot

和各种酶切反应。

3. 简单快速，一小时内即可获得超纯的基因组DNA

4. 广 泛：适用于血液、多种动物细胞和动物组织等。

 注意事项：

1. 结合液CB 或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化。

3. 结合液CB和抑制物去除液IR 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保批pH 大于7.5，pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用 TE 缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

 自备试剂：无水乙醇

 操作步骤：

提示：第-次使用前请先在漂洗液WB 中加入指-*定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

1. 处理材料

a. 血液

如提取材料为血液，可直接使用220μl新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，不足220µl用缓冲液BB补足220µl，振荡混匀。

注意：如需处理更大体积血液，如300μl-1ml，应按以下步骤操作：在样品中加入 3 倍体积红细胞裂解液（例如，300μl血液加入900μl红细胞裂解液），颠倒混匀，室温放置5 min，期间再颠倒混匀几次。10000rpm离心1 min（若离心机-*高转速不允许，也可3000rpm离心5 min，吸去上清，留下白细胞沉淀，加220μl缓冲液BB，振荡至*混匀。红细胞裂解液本公司另外有售，可根据需要来决定购买。

b.  如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量 5-20μl，可加缓冲液 BB 补足 220μl 后进行下面的裂解步骤。

注意：不同组织裂解时间不同，通常需1-3 h即可完成（鼠尾需要消化过夜）。不会影响 后续操作。每小时颠倒混合样品2-3次，用水浴振荡器也可

5.加入结合液CB并充分混匀后，置于70℃水浴10 min，等溶液变清亮，12,000rpm短离心以去 除管盖内壁的水珠。

注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不*，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA 不纯。当血液体积≤200μl且没有采用红细胞裂解处理，或是样本储存条件不佳，水浴后颜 色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀

6.加入220µl的无水乙醇，充分振荡混匀15 sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去 除管盖内壁的水珠。

7.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中），12,000rpm 离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱AC放回收集管中。

8.加入500µl抑制物去除剂IR，12,000rpm离心1 min。倒掉收集管中的滤液。并将离心柱放回收集管中。

9.加入500µl 漂洗液WB，12,000rpm离心30 sec。（使用前请检查是否已经加入无水乙醇）倒掉收集管中的滤液。并将离心柱放回收集管中。

10. 重复步骤9的操作。

11. 将吸附柱AC柱放回收集管中，12,000rpm离心2 min，倒掉废液。将AC吸附柱置于室温放置数分钟，以*晾干吸附材料中残余的漂洗液。