1.高压灭菌器使用时应消毒室内，有专人操作，不得在公共场所使用。
2.插座必须装有连接地线.应确保电源插头插入牢固。切勿损坏电线或使用非的电源线。电源线连接上的弹簧片为保护接地，应保持接触良好。
3.灭菌器上的安全阀和压力表使用期限满一年应送法定计量检测部门鉴定。
4.消毒器物品之间留有间隙，顺序地堆放在消毒器内的筛板上，这样有利于蒸汽的穿透力，可提高灭菌效果。
5.高压灭菌器加热时注意把电源线插头插紧，使插头接地铜片与护罩紧密接触，保证使用安全。加热开始时将放汽阀子摘子放在垂直开放位置，消毒器内冷空气会随时加热由阀孔溢出。当阀孔有急的蒸汽冲出时，将摘子恢复原位。消毒器压务达到所需范围时，适当调整或通断热源，使之维持恒压，并开始计算消毒时间，按不同的物品和包装保持所需消毒的时间。

6.敷料、器械和器皿等消毒后需要干燥时，可在消毒终了时将消毒器内的蒸汽由放汽阀排出，当压力表指针回复到零位后稍待 1-2 分钟，将灭菌器盖打开，并继续加热几分钟，这样能使物品达到干燥目的。
7.溶液培养基等若在消毒终了时立即放汽，会因压力突然下降引起瓶子爆破或消毒器内装溶液溢出等严重事故。所以在消毒终了时不应立即放汽，而应停止加热使其自然冷却20-30分钟，使内压力冷却而下降至零位(压务表指针回到零位)后数分钟，将蒸汽灭菌器放汽阀打开，然后略微打开盖子(开一条缝)，人离开消毒室，待其自然冷却到一定程度再取出。

8.对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压*，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间。

9.注意高压蒸汽灭菌器每次灭菌前应检查灭菌器是否处于良好的工作状态,尤其是安全阀是否良好。消毒后减压不过猛过快。应等压力表归回位时,才可以打开锅门。如果消毒锅内是瓶装溶液, 且突然开锅, 则玻璃骤然遇到冷空气易发生爆裂,必须注意如果突然把锅门开得太大, 冷空气大量进人, 易使包布周围蒸汽凝成水点而堵塞包布孔眼, 阻碍包布内蒸汽排出, 而使物品潮湿。