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对细胞体外培育的二氧化碳培养箱加热方法以及注意事项

时间:2014-03-27      阅读:990

  对细胞体外培育的二氧化碳培养箱加热方法以及注意事项 
  二氧化碳培养箱是经过在培养箱箱体内模仿构成一个相似细胞/安排在生物体内的成长环境,培养箱需求安稳的温度(37°C)、安稳的CO2水平(5%)、安稳的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/安排进行体外培育的一种设备。
  二氧化碳培养箱是经过在培养箱箱体内模仿构成一个相似细胞/安排在生物体内的成长环境,如安稳的温度(37°C)、安稳的CO2水平(5%)、安稳的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/安排进行体外培育的一种设备。
  二氧化碳培养箱运用规模
  其广泛运用于细胞、安排培育和某些格外微生物的培育,常见于细胞动力学研讨、哺乳动物细胞分泌物的搜集、各种物理、化学要素的致癌或毒理效应、抗原的研讨和出产、培育杂交瘤细胞出产抗体、体外授精(IVF)、干细胞、安排工程、药物挑选等研讨范畴。
  用户的需求
  用户对二氧化碳培养箱都有两条zui基本的需求:
  一是需求二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度供给zui安稳的操控,以便于其研讨作业的发展;
  二是需求二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有用的防备,并且能够守时消除污染,以维护研讨成果,避免样品丢失。
  二氧化碳培养箱微处置操控体系  
  微处置操控体系是坚持培养箱内温度、湿度和CO2 浓度稳态的操作体系。微处置操控体系和其它各种功用附件(如高低温主动调理和警报设备、CO2警报设备、密码维护设置等)的运用,使得二氧化碳培养箱的操作和操控都十分的简洁。
  如:LEEC 的PID 微处置器触摸屏操控体系,它能严格操控气体的浓度并将其损耗降低水平,以确保培育环境安稳不变,且能确保长期培育进程中箱内温度,并有液晶显现,图形化进程监控、干涉事情记载等。此外报警体系也是不行少,它能让你及时晓得培养箱呈现的情况,并做出反响,然后zui大极限地降低了丢失,确保实验的接连性。有些培养箱有声/光报警设备,温度改动达±0.5℃,或CO2 浓度改动达±5%时,即会主动报警;有些具有CO2 浓度反常报警显现功用;有些具有低压、断电报警功用。这些设备都是为了便利运用者,以削减繁琐单调的实验进程而规划的。
  二氧化碳培养箱加热方法  
  气套式加热和水套式加热,两种加热体系都是和牢靠的,一起它们都有着各自的长处和缺陷。
  水套式加热
  水套式加热是经过一个独立的水套层围住内部的箱体来坚持温度安稳的,其长处:水是一种*的绝热物质,当遇到断电的时分,水套式体系就能够对比长期的坚持培养箱内的温度性和安稳性,有利于实验环境不太安稳(如有用电约束或常常停电)的用户选用。
  气套式加热是经过遍及箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的,又名六面直接加热。
  气套式与水套式对比,具有加热快,温度的康复比水套式培养箱敏捷的特色,格外有利于短期培育以及需求箱门频频开关取放样的培育。此外,关于运用者来说气套式规划比水套式更简略化(水套式需求对水箱进行加水、清空和清洁,并要常常监控水箱运作的情况,还有潜在的污染危险)。
  三气培养箱是一台新式的高氧培养箱,它的首要技能参数为:
  1. 控温规模 室温 +3℃~45℃(例:室温25℃,则控温规模为28℃~70℃)
  2. 恒温操控精度 ±0.2℃
  3. 温度均匀性±0.2℃
  4. O2浓度操控规模1%--50%(可抵达98%)(N2浓度=100%—CO2浓度—O2浓度)
  5. O2浓度操控精度 0~5%时为±0.2%,5%~20%时为±0.3%
  6. CO2浓度操控规模 0%--20%
  7. CO2浓度操控精度 0~5%时为±0.2%,5%~20%时为±0.3%
  8. 电源 220V 50HZ
  9. 功率 小于450W
  10. O2浓度正常下降至置定值的时刻小于10分钟(O2浓度为1%时)
  11. CO2浓度正常上升至置定值的时刻小于10分钟(CO2浓度为5%时)
二氧化碳培养箱
  二氧化碳培养箱二氧化碳浓度操控  
  二氧化碳浓度能够经过红外传感器(IR)或热导传感器(TC)进行丈量。两种传感器各有优缺陷。
  热导传感器
  热导传感器监控CO2浓度的作业原理是根据对内腔空气热导率的接连丈量,输入CO2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发作改动,这样就会发作一个与CO2浓度直接成正比的电信号。
  TC操控体系的一个缺陷即是箱内温度和相对湿度的改动会影响传感器的度。当箱门被频频翻开时,不只CO2浓度,温度和相对湿度也会发作很大的动摇,因而影响了TC传感器的精度。当需求的培育条件和频频敞开培养箱门时,此操控体系就显得不太适用了。
  红外传感器
  红外传感器(IR)它是经过一个光学传感器来检测CO2水平的。IR体系包含一个红外发射器和一个传感器,当箱体内的CO2吸收了发射器发射的有些红外线之后,传感器就能够检测出红外线的削减量,而被吸收红外线的量正巧对应于箱体内CO2的水平,然后能够得出箱体内CO2的浓度。由于IR体系是经过红外线削减来断定箱内CO2浓度,而箱体内颗粒物能够反射或有些吸收红外线,使得IR体系对箱体内颗粒物的多少对比灵敏,IR传感器运用在进气口具有HEPA空气过滤器的培养箱较适宜。
  二氧化碳培养箱相对湿度  
  箱内湿度关于培育作业来说是一项十分重要但是又常常被疏忽的要素。坚持满意的湿度水平并且要有满意快的湿度康复速度(如在开关门后)才干确保不会由于过度枯燥而致使培育失利。
  当前大多数的二氧化碳培养箱是经过增湿盘的蒸腾作用发作湿气的(其发作的相对湿度水平可达95%左右,但开门后湿度康复速度很慢)。尽量挑选湿度蒸腾面积大的培养箱,由于湿度蒸腾面积越大,越简略抵达zui大相对饱和湿度并且开关门后的湿度康复的时刻越短。
  二氧化碳培养箱
  二氧化碳培养箱
  二氧化碳培养箱污染物的操控  
  污染是致使细胞培育失利的一个首要要素,二氧化碳培养箱的制造商们规划了多种不一样的设备去削减和避免污染的发作,其首要路径都是尽量削减微生物能够成长的区域和外表,并主动扫除污染设备来有用避免污染的发作。
  例如,鉴于CO2培养箱在运用进程中有时会伴有霉菌成长,为确保培养箱免受污染且确保仪器箱体内的生物清洁性,有些公司开发规划了带有紫外消毒功用的CO2培养箱;还有公司规划HEPA滤器能过滤培养箱内空气,可过滤除掉99.97%的0.3um以上的颗粒;此外,主动高温热空气灭菌设备能使箱内温度抵达高温(如200℃)然后杀死一切污染微生物,乃至芽孢等耐高温微生物,这些设备关于细胞培育来说是更有安全确保的。
 二氧化碳培养箱运用注意事项 
  1、二氧化碳培养箱未注水前不能翻开电源开关,否则会损坏加热元件。
  2、培养箱运转数月后,水箱内的水因蒸腾能够削减,当低水位指示灯(WLow12)亮时应弥补加水。先翻开溢水管,用漏斗接橡胶管从注水孔弥补加水使低水位指示灯平息,再计量弥补加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),然后阻塞溢水孔。
  3、二氧化碳培养箱能够做高精度恒温培养箱运用,这时须封闭CO2操控体系。
  4、由于CO2传感器是在饱和湿度下校对的,因而加湿盘有必要时刻装有灭菌水。
  5、当显现温度超越置定温度1℃时,超温报警指示灯(OverTemp7)亮,并发出尖利报警声,这时应封闭电源30分钟;若再翻开电源(温控)开关(Power20)依然超温,则应封闭电源并报修理人员。
  6、钢瓶压力低于0.2MPa时应替换钢瓶。
  7、尽量削减翻开玻璃门的时刻。
  8、假如二氧化碳培养箱长期不必,封闭前有必要铲除作业室内水分,翻开玻璃门通风24小时后再封闭。
  9、清洁二氧化碳培养箱作业室时,不要磕碰传感器和拌和电机风轮等部件。
  10、拆装作业室内支架护罩,有必要运用随机扳手,不得过度用力。
  11、转移培养箱前有必要扫除箱体内的水。排水时,将橡胶管紧套在出水孔上,使管口低于仪器,悄悄吸一口,放下水管,水即虹吸流出。
  12、转移二氧化碳培养箱前应拿出作业室内的搁板和加湿盘,避免磕碰损坏玻璃门。
  13、转移培养箱时不能倒置,一起必定不要抬箱门,避免门变形。
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