SMOBIO蛋白marker FA Q

Q，如何选择适合的产品？

SMOBIO 蛋白marker 分子量范围广、条带清晰锐利

PM2510符合大多数使用者需求

小分子选PM2700

大分子选PM2800

Q，为何大分子条带会消失不见

跑胶缓冲液遭受蛋白酶(proteinase) 污染，或是buffer reuse 太多次，导致长菌以致于有proteinase 存在，或是上样时反复使用同一支 tip。

                                           受到污染后蛋白会从大分子开始降解

解决办法:

1.  上样时使用避免反复使用同一支Tip。

2.  内槽使用新鲜配置的跑胶缓冲液。

Q，为何转膜后条带会歪斜或消失不见？

胶体与膜之间未紧贴，胶体与膜之间仍有缓冲液

模拟试验: 转膜装置未紧贴

解决办法:

1.   增加filter paper 张数(或厚度)à上下各三张

2.   使用滚轮胶体与膜之间气泡或缓冲液赶走

3.   更换新的海绵垫

Q,为何转膜后高分子條帶消失？

1. >100KDa高分子量蛋白会需要比较长的转膜时间及较高的电压

2. 缓冲液重复使用太多次或组成不正确，建议使用新鲜配制的缓冲液

3. 转膜液体可添加0.01〜0.1％SDS以促进高分子量蛋白质的转移

在正确转膜条件下，10-310kDa在转膜后都是清晰可见的状态

Q,为何小分子条带 (<5kDa) 会跑不出来？

条带在不同缓冲溶液系统、不同浓度会有不一样的分布 (如下图)，

须根据需求来选择胶的浓度或挑选适合的缓冲溶液系统

✓ 若<10kDa分子分不开，建议使用MES buffer

✓ 若>100kDa分子分不开，建议使用MOPS buffer

Q,为何洗膜后条带会变弱或不见

1. 洗膜液体中的Tween20浓度过高 (建议使用0.05%~1%)

2. 洗膜转速过高(建议使用25~50 rpm)