一. Folin——酚试剂甲

溶液1):1:2g无水碳酸钠溶于100m10.2mol/l氢氧化钠中（以配制成 5X),用时稀释5倍。

溶液2）:0.5g 五水硫酸铜溶于100ml1％酒石酸钾钠（或酒石酸钠）溶液。将稀释后

的溶液 1 与溶液 2 ，以50:1的比例混合。混合后即为Folin——酚试剂甲，此试剂只

能用一天，过期失效。

二.Folin——酚试剂乙

原溶液度为2moL/L使用前需稀释一倍，用多少稀释多少，使其zui后浓度为 1moL/L,

此为Folin——酚试剂乙应用液。Folin——酚试剂乙原液平时应封闭贮存于 4°C冰箱

中避光

保存。

三.操作方法

标准曲线的制作：取14支试管分成两组，按下表顺序加入试剂，混匀，于室温

放置10分钟。再加入0.5毫升试剂乙，立即摇匀，在室温放置 30 分钟，然后于

500nm 处比色。测定光密度值。取两种测定的平均值，以蛋白质浓度为横座标，

光密度值为

纵座标，绘制标准曲线为

定量的依据。

样品测定：

（1）取 1 毫升样品溶液（约含 20-250微克多肽或蛋白质)加入 5 毫升试剂甲混匀，

于温室放置 10 分钟。

（2）加入0.5毫升试剂乙（Folin——酚），立即摇匀，于室温保温 30 分钟：然后

500nm处比色，以 1 毫升水代替样品作空白对照。测定后，可以从标准曲线中查出

未知样品浓度。若用 0.5 厘米光程的比色杯进行比色，可按下面方法进行操作：取

0.2 毫升样品溶液（约含 5-100微克多肽或蛋白质），加入 1 毫升试剂甲（可选用

0.3-0.5 厘米直径的小试管）混匀，10分钟以后，再加入 0.1 毫升试剂乙，立刻混

匀，30 分钟后比色一般来说，若多肽或蛋白质浓度在 2-25 微克，则采用波长

755nm，而 25 微克以上则采用 500nm 比色为宜。