了解与认识流式细胞仪
时间:2022-03-11 阅读:2089
在实验室环境中分析细胞时,流式细胞仪是一种广泛使用且全面的单细胞分析方法。本文详细介绍了流式细胞仪及工作原理和系统组成。
什么是流式细胞仪?
流式细胞技术是一种用于分析细胞的具有多种应用的技术,包括细胞计数、表型分析、细胞周期评估和生存力检测等不同应用。流式细胞仪中激光产生的光被样品中的细胞散射,由检测器测量,然后转换为可以分析和测量的信号。
流式细胞仪如何工作?
开始使用流式细胞仪,第一步是准备要分析的样品。从细胞培养物,血液或分解的组织中获得的细胞应制成悬浮液。将该细胞悬浮液分成数个试管进行染色,保留未染色细胞作为对照。通过添加标记有荧光探针的抗体或染色细胞成分的染料对其他细胞样品染色。分析细胞内蛋白质时,首先必须将细胞固定,使用福尔马林缓冲液并进行透化(使用透化剂),以使抗体和染料进入细胞。细胞与抗体或染料孵育后,将细胞在缓冲液中洗涤,然后重悬在基于盐的缓冲液中进行分析。然后将准备好的样品引入流式细胞仪。
流式细胞仪组成部分有哪些?
三个主要组成部分:液流系统,光学系统和电子系统。
在流式细胞仪的中心部分-流通池-样品材料遇到激发光并散射光,随后该光被检测系统读取和记录。
流式细胞仪至少还应包含一个激光器,一个检测器和一个流控系统,以确保细胞快速流过激光束。多年来,流式细胞仪中的激光器数量以及检测器的数量和质量已显着增加。这些发展扩大了可以立即检测到的标记的数量。
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