凝胶成像系常见问题的简要分析
时间:2017-06-19 阅读:1828
凝胶成像即对DNA/RNA/蛋白质等凝胶电泳不同染色(如eb、考马氏亮蓝、银染、sybr green)及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。凝胶成像系统可以应用于分子量计算,密度扫描,密度定量, PCR定量等生物工程常规研究。
1、凝胶成像系统的原理?
样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。
样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度,通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀,较为大限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。
2、凝胶成像的适用范围?
1.蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析。
2.可以确定生物分子的分子量。
3.可以应用于生物分子的定量分析中。
3、凝胶成像一般操作步骤?
1.打开凝胶成像系统开关。
2.打开电脑,系统自动打开并进入成像软件。
3.打开凝胶成像系统前面板,选择使用紫外透射光源或者白光透射光源,将相应光源安放到位。
4.将样品放置在透射光源的样品台上。
5.在成像操作界面里面选择使用Upper white光源,点击绿色(即时成像)按钮。
4、是不是像素越高,产品就越好?
像素是要针对成像设备来看的,比如数码相机与CCD的像素就不具备可比性,其次CCD本身的质量比单纯的像素高低更重要。对于同级别CCD较为重要的指标是其大小,也就是CCD尺寸,尺寸越大其本身价值就成几何倍地增长。
5、配件紫外反射灯源的主要用途为何?
紫外反射灯源使用并不广泛,主要是提供非透明材质的DNA跑胶载体如纸层析等的成像需要而使用。由于比较常用的还是透明的琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶,透射光源*可以满足,因此将紫外反射光源作为选配件不列入标配中。