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ABI Veriti 梯度PCR仪操作方法

时间:2018-05-09      阅读:3802

PCR技术是一种分子生物学技术,用于在几个数量级上扩展一段DNA的一个或几个拷贝,复制数千到数百万个DNA序列。作为一种廉价但可靠的方法,能够重复复制DNA的聚焦片段。ABI公司的PCR仪器在行业内受到普遍的欢迎。今天小编 Veriti 梯度PCR仪为例就为您简单介绍一下具体的操作方法。

步骤:

1、打开PCR仪的热盖,插入0.2ml的样品管,盖好热盖;

2、打开PCR仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟;

3、初始化完成后,显示主菜单;

4点“Browse/New Methods”,进入PCR程序列表;

5、可以直接点一个PCR程序,选择“Start Run”运行;点右边的符号,可以选择不同的文件夹。如要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序;

6、添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一段新的程序;

7、修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定;

8、增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤;

9、删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除;

10、建立梯度模式:点中一个步骤,再点“Option”键;

11、点“VeriFlex step”,出现梯度创建窗口;

输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定。注意:相邻的两个梯度温度之差较为大不能*过5℃!

12、建立渐变模式:

1)点中一个步骤,再点“Option”键;

2)点“Auto Delta”,出现渐变模式创建窗口;

点“Staring Cycle”,输入起始循环数;点“Delta Temperature”,输入温度变化值;点“Delta Time”,输入时间变化值。渐变模式适用于touchdown PCR,可以提高PCR反应的特异性。例:输入起始循环数为2,温度变化值为+0.5℃,时间变化值为+5s,则表示从第2个循环开始,每循环一次升温0.5℃,时间增加5s。
13、增加暂停步骤:

1)点中一个步骤,再点“Option”键;

2点“Pause”;

输入暂停的起始位置,暂停间隔和暂停时间,点“Done”确定。上图表示每隔10个循环暂停10s,在10个循环的第1个循环之前暂停。

14、编辑PCR程序完成后,点“Save”保存;

点“Run Method”,输入PCR程序名称;点,选择保存PCR程序的文件夹(如果要保存在USB文件夹中,需要先插U盘)。再输入反应体积和热盖温度(这两项在运行程序时可以修改)。点“SaveδExit”确定;
15、回到PCR程序列表界面,选择新建的PCR程序;

16、点“Start Run”,出现运行参数设置窗口;

17、仪器运行选中的PCR程序,显示运行监视窗口;

18、暂停运行:
点“Pause Run”,仪器暂停,出现暂停选项栏;

“Remaining Time”显示暂停剩余时间,“Elapse Time”显示已暂停时间。
如果需要修改暂停时间,点,输入时间值,点“Done”确定;点“Resume Run”,结束暂停,继续运行PCR程序。
19、终止运行:点“Stop”可以终止整个PCR程序;
20、反应报告:
PCR程序结束后,仪器会自动生成反应报告,显示当次反应的各项指数。该报告可以保存和打印;

21、PCR反应结束后,打开热盖,取出样品,关闭仪器电源。并开盖放置,使热盖和加热模块正常降温。

以上就是ABI VeritiPCR仪的操作步骤,希望对各位有所帮助。如果您有任疑问,欢迎您咨询上海巴玖,期待给您一个满意的回复。

 

 

 

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