美国abi7500pcr仪使用方法讲解
时间：2020-02-09 阅读：6547
美国abi7500pcr仪使用方法讲解
Q:7500快速定量PCR仪可以使用0.2ml PCR反应管或者96孔板吗?
A:不可以，7500 快速定量PCR仪只支持0.1ml PCR反应管或者96孔板
Q:如何监控反应体系是否有蒸发?
A:查看Rox信号是否在整个PCR过程中保持一致。在多组分图谱界面，选择单孔，如果Rox信号逐渐增高，代表样品孔中有蒸发。如下图所示:
Q:内参基因与目标基因是否需要在相同的反应板上运行相对定量?
A:是，内参基因必须和目标基因在相同的反应板上。软件可以根据在相同反应板上的内参基因和目标基因自动进行相对定量计算，并计算估值区间。
Q:定量PCR系统支持的荧光染料有哪些?
A:下面是实时定量PCR仪器能够检测染料的表:
DYE | 7300 | 7500 | 7900 |
Cy3™ |
| X |
|
Cy5™ |
| X |
|
FAM™ | X | X | X |
JOE™ | X | X | X |
NED™ | X | X | X |
ROX™ | X | X | X |
SYBR® Green I | X | X | X |
TAMRA™ | X | X | X |
Texas Red® |
| X |
|
TET™ |
|
| X |
VIC® | X | X | X |
Q:用户是否可以添加自定义染料?
A:可以，可以添加自定义染料，但染料的激发和发射波长必须与仪器的滤光片设置兼容。
Q:常用荧光染料的发射波长为多少?
A:
染料名称 | 发射波长(nm) |
FAM™ | ~520 |
SYBR® Green I | ~520 |
TET™ | ~540 |
JOE™ | ~550 |
VIC® | ~550 |
NED™ | ~580 |
CY3™ | ~580 |
TAMRA™ | ~580 |
ROX™ | ~610 |
Texas Red® | ~610 |
CY5™ | ~670 |