康宁细胞计数仪（货号为6749）可计数的细胞大小和浓度范围是多少?
可计数的细胞大小范围为4～70 μm，细胞浓度范围为5 x 104～1.0 x 107细胞/mL。

康宁细胞计数仪能否对活细胞和死细胞进行区分？
可以。通过细胞悬液与台盼蓝1:1混合，台盼蓝会将死细胞染成深蓝色，而活细胞则不被台盼蓝染色。将混合液加入计数板中计数时，在软件页面选择“trypanblue， yes (1:1)”, 计数仪会自动分析死活细胞的数量及比例，并将结果直接展示在结果区，该结果无需再乘以2。

康宁细胞计数仪能否对细胞团簇进行区分并准确计数？
可以分析含有细胞簇的样品。以下是对于293T细胞计数的测试图片供您参考，两图中红圈圈出部分是细胞团簇，右图中绿点代表检测到的活细胞，红点代表识别的死细胞。

计数时，视野中心细胞清晰，而边缘细胞对焦不清晰，尤其是小于10um的细胞，是否会影响计数结果？
由于计数仪镜头是球形的，在对焦准确时，即使边缘的对焦不是很清晰，仪器仍然会对视野中计数范围内（4-70 μm）的细胞进行计数。若您对计数结果的准确性有较高的要求，建议您拍摄多张图片进行计数，软件可以将多张图片中的结果整合取平均数，以提高计数准确性。

如何更好地对焦, 从而确保计数准确？
为了准确地计数分析，需要确保对焦准确。通过聚焦旋钮多次顺时针或逆时针旋转，并且可以进一步放大图像观察，能够看到活细胞有明亮的中心和清晰的边缘，如下图所示，左侧图为未成功对焦，而右侧图中对焦准确：


 

康宁细胞计数仪能否对外周血单核细胞（PBMC）进行计数？
可以。PBMC细胞大小约7-8 μm，符合康宁细胞计数仪的计数范围。在对PBMC计数时，需要注意避免碎片等非细胞杂质被识别成死细胞从而影响结果，因此准确对焦非常重要。死细胞在对准焦后呈现出实心黑点的样子，如下图所示，尽可能避免对焦后有光环或模糊状的存在。