表1:

       从上表1可看出，对于灵敏度的描述，主要有“Sensitivity”和“Detection Limit”两种说法,我们分别来看它们的定义：
       A: Detection Limit： 检出限，这里有两种理解：分析方法检出限和仪器检出限

       1.分析方法的检出限：国际理论与应用化学联合会（IUPAC）对检出限的规定：对各种光学分析方法，可测量的最小分析信号XL以下式表示：

• XL＝Xb+kSb

• 式中Xb―空白多次测定的平均值（n≥20）

• Sb－空白多次测定的标准偏差

• k－根据一定置信水平确定的系数（IUPAC规定k＝3，此时的置信水平为90%）。为了提高检出限的可靠性，人们还提出了保证检出限（Limit of Guaranteed Detection）的概念，也就是上述DL公式中k＝6时的检出限。

       2.仪器检出限：用于评价仪器的检测能量，即：相对应背景，仪器可靠检测的最小信号，通常用信噪比S/N来表示，为S/N≥K,根据置信度概念，K可取2或3，为合理的赋予值。

       B: Sensitivity：灵敏度。对于灵敏度概念而言，在IUPAC的定义是：方法的灵敏度m表示被测组分浓度或含量改变一个单位时所引起的分析信号的变化，即m=dX/dc。其中X为分析信号，c为浓度或含量。在分析方法的校正曲线上，一般可以认为灵敏度就是分析校正曲线的斜率。曲线斜率越大，表示灵敏度越高。但在仪器参数中所说的“Sensitivity”并不是表示这一概念，而是具体指的是“DL（Detection Limit）或LOD（Limit Of Detection）”，比如BMG在Sensitivity的注解中就明确说明指的是“LOD”。如果上述（表中）参数描述的“Detection Limit”（Tecan/MD/PE）指的是“方法检出限”且“Sensitivity”(BMG/Bio-Tek/Thermo)指的是“LOD”时，则Sensitivity＝LOD＝DL＝Detection Limit。虽然描述词不同，但是概念是相同的，其参数可以直接比较。

       目前从各厂家方公开的资料中，只有BMG明确说明采用国际理论与应用化学联合会（IUPAC）的检测标准去例明参数。也只有BMG公司在参数中明确写明了其Sensitivity的定义，包括定义、详细的测定条件等。例如在BMG最新推迟的高性能渐变滤片型光栅多功能酶标仪CLARIOstar的参数描述中，其FI（荧光）顶读的灵敏度为FI Filters (top) < 0.4 pM (< 8 amol/well Fluorescein, 384sv, 20 μL)，就在参数后面明确写明了测试灵敏度时的方法：采用荧光素（Fluorescein）为底物做6点的标准曲线，采用的是384 Small Volume微孔板，20μL的检测体系。这里要清楚知道，测定参数时采用的微孔板类型以及检测体系的体积非常重要。因为不同的条件，其灵敏度计算结果是不一样的。下面表2为各酶标仪厂家的方网站的参数资料：

表2:

       从表2中可以看出，每个厂家都有不同的标准去定出其检测灵敏度。一般会把所用的检测浓度和质量写出来，但也有些厂家或型号只例出浓度单位，例如：Bio-Tek Neo，MD SpectraMax M5/M3等。要全面比较检测灵敏度，其实要配合浓度、质量和检测体积几个要数作考虑。如果只有浓度(M)，那实际检测的体积是多少?200μl?100μl或是20μl?不同的体积会使实际检测的质量不同，这可以是十倍或更多的差别。

       除此之外，统一性的检测标准也很重要。例如：BMG所有型号的顶读荧光每次都会用384 small volume微孔板，并以20μl的体积进行检测。从表2中可以看到由中端研究型的FLUOstar Omega到端的PHERAstar FS都是用统一的检测标准去量度和显示其灵敏度。如果型号间的检测标准不一，如Tecan入门型号F200和端型号F500的参数，前者是用100μl做出的；后者是用10μl做出的。这样用户会发现一个有趣现象 – 就是单看浓度，F200（0.85pM）入门型好像比F500（1pM）端型号更灵敏！当然用户也会有疑问，为什么较低端F200比端的F500要多用10倍体积？大家同样是384孔板，为什么检测的体积标准不一样呢？那是否那100μl做出来的参数用20μl时可以做出同样的灵敏度(85 amol)？这相信值得用家去思考一下。

       BMG的所有参数是根据IUPAC标准去检测出来，所用的方法、体积、微孔板、浓度和质量等，都清楚例明。在384孔板中一贯采用20μl体积是因为这是接近实际实验的情况。有些厂家所用的检测体积与现实情况其实有差距，例如Biotek的Synergy 2荧光参数标示为：“Fluorescein 1 pM typical (0.1 fmol/well 384-well plate) – Top”，虽然厂家没有写出来，但只要小心计算，可得出384孔板时的参数是用100μl的体积去做检测。实际上，市场上的384孔板的每孔体积一般只有约110μl (例如：CORNING)，而微孔板厂家推荐使用体积为20μl -80μl。如果用100μl去做检测是有点不太现实，因为体积太满会令孔内液体在检测移动过程中比较容易浅出，这也使孔板在实验过程中无法使用振动功能去摇匀孔内的样本，影响检测结果。再者，使用384孔板的原因除了因为高通量外，更重要的是想用更小的样本和试剂体积。如果在384孔板上要用到100μl的试剂样本，那跟原来想节省成本的原意就背道而驰了。当然，检测体积愈小，对仪器的检测灵敏度要求愈高，对厂家挑战也愈大。但BMG宁可放弃用较大体积做出来的漂亮参数，也要忠于实际操作，用小体积做出参数给客户参考。事实上，即使是BMG最入门的Optima系列的化学发光和荧光酶标仪，也被客户用来发表了超过110份Nature或Nature Publishing Group的文章，其优良的性能实际是不容怀疑。

       综合以上各方面，在对酶标仪的参数进行对比时，单位的统一非常重要，同时测定参数时采用的条件同样重要。对于众多厂家的仪器，其实很难用一个全一样的方法去比较，因为不同厂家所用的条件都不一样。毕竟仪器的性能和表现是要用家使用出来，而不只是靠把参数写得漂亮。