早出的峰变形，原因及其解决方法

 

一、酸性或碱性化合物的峰拖尾，原因及其解决方法

 

1、缓冲不合适 

    a、使用浓度50-100mM的缓冲液 b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液

 

二、保留时间波动，原因及其解决方法

 

1、温控不当

     调好柱温

2、流动相组分变化

     防止变化（蒸发、反应等）

3、色谱柱没有平衡 

     在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱

 

三、基线漂移，原因及其解决方法

 

1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。） 

     控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图

2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 

     使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。

3、流通池被污染或有气体

     用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸）

4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线） 

     取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。

5、流动相配比不当或流速变化 

     更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。

6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 

     用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。

7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 

     检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂

8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 

     使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。

9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 

     重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。

10、检测器没有设定在zui大吸收波长处。 

       将波长调整至zui大吸收波长处